三种有益藻类培养条件优化及种间竞争的初步研究

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微藻作为水体中的初级生产者,能够有效地进行光合作用,并将氨氮、亚硝酸盐、硫化氢等有害物质转化为有机化合物,改善水环境;微藻中富含的多种营养物质,为水产经济动物提供优质的生物饵料,对水产养殖有至关重要的作用。本研究利用单因素试验、Plackett-Burman试验和Box-Behnken试验对普通小球藻(Chlorella vulgaris)、椭圆卵囊藻(Oocystis elliptica)和谷皮菱形藻(Nitzchia palea)进行纯培养和共培养试验,确定其最适温度、光照、pH、营养盐浓度及其种间竞争机制,为有益藻类的高密度培养和多藻调理水质提供数据依据。试验结果如下:通过单因素试验确定普通小球藻最佳培养条件:温度25℃,光照强度5000 lux,pH7;以BG11培养基为基础,通过Plackett-Burman试验获得的三个显著因素为NaHCO3、KH2PO4、NaNO3,通过响应面分析后优化的培养基配方为:NaNO3 550 mg/L、KH2PO460 mg/L、NaHCO3 80 mg/L、C6H8FeNO7 6 mg/L、MgSO4 75 mg/L、CaCl2 36 mg/L和C6H8O7 6 mg/L,A5溶液1 mL/L。利用优化后的培养基在最适培养条件下培养普通小球藻15 d后,细胞密度较优化前提高了45.65%。通过单因素试验确定椭圆卵囊藻最佳培养条件:温度25℃,光照强度5000 lux,pH8;以BG11培养基为基础,通过Plackett-Burman试验获得的三个显著因素为NaHCO3、KH2PO4、NaNO3,通过响应面分析后优化的培养基配方为:NaNO3 300 mg/L,KH2PO420 mg/L,NaHCO3 80 mg/L,C6H8FeNO7 6 mg/L、MgSO4 75 mg/L、CaCl2 36 mg/L和C6H8O7 6 mg/L,A5溶液1 mL/L。利用优化后的培养基在最适培养条件下培养椭圆卵囊藻15 d后,细胞密度较优化前提高了47.13%。通过单因素试验确定谷皮菱形藻最佳培养条件:温度20℃,光照强度2000 lux,pH8;以CSI培养基为基础,通过Plackett-Burman试验获得的三个显著因素为NaSiO3、NaNO3、KH2PO4,通过响应面分析后确定的优化后培养基配方为:NaNO3 500 mg/L、KH2PO4 15 mg/L、NaSiO3 80 mg/L、VB1212 0.1μg/L、生物素0.1μg/L、MgSO3 40mg/L,PIV溶液6mL/L。利用优化后的培养基在最适培养条件下培养谷皮菱形藻15 d后,细胞密度较优化前提高了80.51%。三种藻类两两混合培养时,谷皮菱形藻对普通小球藻的平均抑制作用是其相反抑制的7.08倍,谷皮菱形藻对椭圆卵囊藻的平均抑制作用是其相反抑制的1.44倍,椭圆卵囊藻对普通小球藻的平均抑制作用是其相反抑制的8.85倍。三种藻类共培养时,普通小球藻对谷皮菱形藻的平均抑制作用是其相反抑制的39.75倍,谷皮菱形藻对椭圆卵囊藻的平均抑制作用是其相反抑制的1.71倍,普通小球藻对椭圆卵囊藻的平均抑制作用是其相反抑制的1.98倍。
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