【摘 要】
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近年来,国内外的遗传转化研究取得了很大进展.基因表达调控作为植物分子生物学研究的热点,是植物遗传转化进一步深入及加快转基因植物商品化进程的一个关键因素.而核骨架附着
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近年来,国内外的遗传转化研究取得了很大进展.基因表达调控作为植物分子生物学研究的热点,是植物遗传转化进一步深入及加快转基因植物商品化进程的一个关键因素.而核骨架附着区(SARs)可能有利于转基因形成一个独立的区域,使它不受周围宿主染色质的影响,从而使转基因稳定表达或高效表达.为研究核骨架附着区序列对外源基因表达水平的影响,选取了定位于烟草T3染色体长臂末端的H9 SAR片段.根据已发表的H9SAR的DNA序列,该文通过PCR扩增,得到了该DNA片段,长度约600bp.然后将H9 SAR与报告基因GUS相连构建嵌合基因,通过检测GUS活性来判断H9 SAR的作用.对得到的转基因烟草进行PCR分子检测,证明了转基因烟草的基因组中含有相应的外源DNA.接着进行GUS活性检测,经过组织化学染色和荧光分析,结果含有H9 SAR片段的转基因烟草中GUS基因的表达活性高于不含该片段的转化植株.实验结果初步表明,H9 SAR有助于提高植物体内外源基因的表达水平,为利用核骨架附着区建立高效的植物表达体系做了有益的探索.
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