厌氧纤维分解菌的分离、筛选及与农药相关性研究

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在严格的厌氧条件下,从双季稻区水牛的粪便和胃残渣中共分离了230个标样,得到1150个菌株。通过对这些菌株降解滤纸速度的观察,筛选出了3株纤维素分解能力较强的细菌。其中以301号菌株分解纤维素能力最强,将1.7×10~3cfu/mL的菌液1mL加入到含有滤纸的9mL的2号培养液中培养,分解粗滤纸50%只需3d,而使其全部分解也只需7d。通过JSM-6360电镜4×10~4倍放大观察此细菌为圆椭圆形,其直径为225nm左右。 初步测定301号菌株的最佳培养条件和培养方法为:在37℃厌氧条件下,301号菌株最佳培养液为2号培养液,最佳培养时间是7d,最佳pH值是7.5。 取301号菌株取1ml菌液(1.7×10~3cfu/mL)加入到含有滤纸条和不同浓度的9ml含农药培养液中培养,观察菌株降解滤纸速度,农药在低浓度(0.1mg/L、0.2mg/L)下对厌氧纤维分解菌降解纤维素的活力影响不大。除草剂(苄嘧磺隆和丁草胺)在低浓度下甚至对其活力有一定的促进作用。而在高浓度(0.4mg/L、0.8mg/L、1.6mg/L)下杀菌剂(井冈霉素和稻瘟清)几乎能完全抑制厌氧纤维分解菌的活性;杀虫剂(三唑磷和杀虫双)对其也有明显的抑制作用;而除草剂对厌氧纤维分解菌的活力几乎无影响。 对301菌株酶活力进行测定,以微晶纤维素作底物酶活力最高,滤纸作底物酶活力次之,CMC(羧甲基纤维素钠)作底物酶活力相对较低。同时,其产酶高峰期在第4d至第7d,其中以第7d最高,在第8d开始下降。 测定301菌株对稻草叶、稻草杆和滤纸降解活性,其降解稻草叶、稻草杆和滤纸活性较高,其中又以降解滤纸速度最快。放入试管中培养前后称其干重,3d降解了56.33%,7d降解了97.00%;稻草叶次之,3d降解了20.98%,7d降解了65.90%:相对而言,稻草杆较慢3d降解了6.99%,7d降解了26.19%。
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