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目的:应用质谱研究自身免疫病患者和正常人血清中免疫球蛋白的N-糖,比较其含量与结构上的差异,分析N-糖对自身免疫病(autoimmunity disease,AID)的检测价值,并阐述其在免疫系统中的功能与作用。方法:(1)应用饱和硫酸铵盐析和Protein G柱提取和纯化干燥综合征(SS)、系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎(RA)病人和正常人血清中的总免疫球蛋白(Ig)和免疫球蛋白G(IgG);(2)PNGase F酶酶切释放N-糖;(3)质谱分析N-糖的含量和结构;(4)统计比较IgG和总Ig中N-糖的差异,并进行相关性和检测价值分析。结果:(1)疾病组与正常对照组血清IgG上N-糖的差异:共鉴定了31种N-糖,统计显示G0(末端半乳糖全部缺失)、Core Fucosylated(核心岩藻糖基化)结构的N-糖在SS、SLE和RA中均升高,Sialylated(唾液酸化)明显下降,而Highmannose(高甘露糖)只在SS和RA中下降。这些N-糖的变化程度在相应的自身抗体阳性病人中更明显,且AUC值都在0.8以上,具有一定的诊断价值。(2)疾病组与正常对照组血清总Ig上N-糖的差异:共鉴定了38种N-糖,统计显示G0在SS和SLE中都上升,Sialylated和Bifucosylated(双岩藻糖基化)都明显下降,Core Fucosylated和Highmannose只在SS中上升。多级质谱解析发现唾液酸是α2,6-连接,Bifucosylated主要是Lewis X与H2结构,其AUC值为0.825。结论:N-糖基化修饰对免疫球蛋白的结构维持和活性调控具有重要作用。本课题中,我们新发现在病人中,IgG和总Ig上Core Fucosylated的N-糖含量升高,α2,6-Sialylated的N-糖下降,且在三种AID中,N-糖的变化程度不同。另外,Lewis X与H2结构的Bifucosylated在病人总Ig中明显下降。ROC分析结果显示这些N-糖能有效地的诊断和鉴别三种AID。这些特征性变化的N-糖参与影响抗体与Fc受体的结合,调节抗炎和促炎作用,对自身免疫病的机制研究和临床诊断检测具有重要意义。