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目的：人型支原体常寄居在人体的泌尿生殖道，可引起泌尿生殖道炎症、不孕不育及产后新生儿感染等多种疾病。由于反复感染及用药不规范等因素，使人型支原体对氟喹诺酮类药物的耐药性越来越严重，给临床治疗带来极大的挑战。本研究采用微量肉汤稀释法检测人型支原体对氟喹诺酮类药物的耐药性，探索拓扑异构酶基因gyrA, gyrB, parC和parE突变与耐药性产生的相关机制，对于掌握耐药株的流行病学资料和指导临床合理用药具有重要意义。
方法：1. 用商品化试剂盒筛选出对氟喹诺酮类药物耐药的人型支原体株，然后用16S rRNA基因测序技术对筛选株进行分子鉴定和确认。严格按照CLSI的标准，用微量肉汤稀释法进行氟喹诺酮类药物MIC值的测定及耐药性分析。
2. 针对人型支原体gyrA，gyrB，parC，parE基因的喹诺酮耐药决定区域(quinolone resistance-determining regions, QRDRs)设计引物，用PCR技术对耐药株的拓扑异构酶基因进行扩增测序，序列比对采用DNAMAN软件和BLAST进行分析。
结果：1. 2016年10月至2017年9月四川省医学科学院.四川省人民医院（东院）微生物实验室共分离出84株人型支原体，其对环丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星和加替沙星的耐药率分别为90.5%(76/84),85.7%(72/84), 73.8%(62/84) 和71.4%(60/84)。
2. 对氟喹诺酮类药物不同程度耐药的人型支原体52株进行了拓扑异构酶基因的扩增测序，其中对莫西沙星和加替沙星耐药的41株均发生了GyrA S153L的氨基酸变异，对环丙沙星和左氧氟沙星耐药的51株发生了ParC S91I的氨基酸变异。GyrA S153L、ParC S91I、ParC K144R、ParC A154T和ParE A463S的氨基酸变异发生率分别为78.8%(41/52)、98.1%(51/52)、42.3%(22/52)、1.9%(1/52)和3.8%(2/52)。ParC A154T 和ParE A463S 为本次研究的新发现，GyrB无任何氨基酸变异的发生。
结论：1. 人型支原体对氟喹诺酮类药物的耐药性较严重，主要与gyrA和parC基因突变导致的氨基酸改变密切相关。
2. 莫西沙星和加替沙星对人型支原体的首要作用靶位是DNA 旋转酶，环丙沙星和左氧氟沙星对人型支原体的首要作用靶位是DNA 拓扑异构酶IV。人型支原体对氟喹诺酮类药物的高水平耐药则需要DNA旋转酶和DNA 拓扑异构酶IV两种变异的共同参与。
方法：1. 用商品化试剂盒筛选出对氟喹诺酮类药物耐药的人型支原体株，然后用16S rRNA基因测序技术对筛选株进行分子鉴定和确认。严格按照CLSI的标准，用微量肉汤稀释法进行氟喹诺酮类药物MIC值的测定及耐药性分析。
2. 针对人型支原体gyrA，gyrB，parC，parE基因的喹诺酮耐药决定区域(quinolone resistance-determining regions, QRDRs)设计引物，用PCR技术对耐药株的拓扑异构酶基因进行扩增测序，序列比对采用DNAMAN软件和BLAST进行分析。
结果：1. 2016年10月至2017年9月四川省医学科学院.四川省人民医院（东院）微生物实验室共分离出84株人型支原体，其对环丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星和加替沙星的耐药率分别为90.5%(76/84),85.7%(72/84), 73.8%(62/84) 和71.4%(60/84)。
2. 对氟喹诺酮类药物不同程度耐药的人型支原体52株进行了拓扑异构酶基因的扩增测序，其中对莫西沙星和加替沙星耐药的41株均发生了GyrA S153L的氨基酸变异，对环丙沙星和左氧氟沙星耐药的51株发生了ParC S91I的氨基酸变异。GyrA S153L、ParC S91I、ParC K144R、ParC A154T和ParE A463S的氨基酸变异发生率分别为78.8%(41/52)、98.1%(51/52)、42.3%(22/52)、1.9%(1/52)和3.8%(2/52)。ParC A154T 和ParE A463S 为本次研究的新发现，GyrB无任何氨基酸变异的发生。
结论：1. 人型支原体对氟喹诺酮类药物的耐药性较严重，主要与gyrA和parC基因突变导致的氨基酸改变密切相关。
2. 莫西沙星和加替沙星对人型支原体的首要作用靶位是DNA 旋转酶，环丙沙星和左氧氟沙星对人型支原体的首要作用靶位是DNA 拓扑异构酶IV。人型支原体对氟喹诺酮类药物的高水平耐药则需要DNA旋转酶和DNA 拓扑异构酶IV两种变异的共同参与。