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目的:缺血性脑血管病是常见病、多发病,病死率和致残率均高。大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)是缺血性脑中风的常见部位。脑缺血后损伤是一个复杂的病理级联反应,核因子-κB (nuclear factor kappa B, NF-κB)信号通路激活在缺血性脑中风引起的神经细胞死亡中起着重要的作用,采用药物抑制脑缺血导致的NF-κB信号通路激活是缺血性脑中风临床药物治疗的重要切入点。大量的药理和临床研究发现氧化苦参碱(oxymatrine, OMT)具有抗炎、抗凋亡、抗病毒、抗肿瘤等多种药理作用。在中枢神经系统氧化苦参碱除了镇静、镇痛扩张小鼠脑膜血管,增加局部血流量外,还能降低脑缺血后髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)活性,抑制脑组织环氧合酶(cyclooxygenase,COX-2)的过度表达和胶质细胞活化从而抑制炎症反应。本实验在大鼠永久性大脑中动脉阻塞所致的脑缺血模型上观察脑缺血后TWEAK、NF-κB的表达,以及OMT在脑缺血损伤中的神经保护作用及其对NF-κB信号转导通路的抑制作用。方法:采用成年健康雄性Sprague-Dawley大鼠,随机分为假手术组(Sham)、MCAO组、OMT大剂量组(MCAO+ OMT 120mg/kg, OMT high dose)、OMT小剂量组(MCAO+ OMT 60mg/kg, OMT low dose)、正常对照组(Normal)。应用Longa等的线栓法建立MCAO大鼠模型。给药组动物梗死后立即腹腔注射60或120 mg/kg的氧化苦参碱,以后每天一次。MCAO组、Sham组和Normal组给予等容量生理盐水。术后6 h、24 h、48 h和72 h对大鼠进行神经功能评分。评分完毕将动物断头处死,用干湿重法测定脑组织含水量,用2% 2,3,5-三苯基四唑氮红(triphenyltetrazolium chloride, TTC)染色法测算脑梗死体积,用免疫组化和逆转录多聚酶链反应(Reverse Transcription–Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)检测NF-κB和TWEAK的表达。结果:1 MCAO、OMT大剂量组和OMT小剂量组大鼠均出现不同程度的左侧肢体偏瘫。OMT大剂量组的神经功能评分低于MCAO组(P<0.05)。OMT小剂量组与MCAO组神经功能评分无统计学差异。2 Sham组和Normal组无梗死灶。与MCAO组相比,OMT大剂量组梗死体积明显减小(P<0.01),OMT小剂量组无统计学差异。3 MCAO组、OMT大剂量组和OMT小剂量组脑组织含水量均在术后6 h开始升高,48 h达高峰,72 h开始下降。与MCAO组相比,OMT大剂量组的脑组织含水量明显下降。OMT小剂量组除48 h含水量略有下降外,其余时间点均无统计学差异。4脑缺血6 h后NF-κB p65核阳性细胞数目增多,48 h达高峰,72 h逐渐下降。OMT大剂量组核阳性细胞数明显少于MCAO组,OMT小剂量组与MCAO组的差异无统计学意义。RT-PCR检测显示mRNA表达的规律与免疫组化的变化规律相似。5脑缺血6 h后TWEAK的阳性细胞数与mRNA表达量都开始增多,48 h达高峰,72 h逐渐下降。OMT大剂量组较MCAO组TWEAK表达量明显减少,OMT小剂量组无明显变化。6脑缺血后各时间点NF-κB、TWEAK的蛋白和mRNA的表达呈显著性正相关。大剂量OMT可明显抑制脑缺血后大鼠脑组织中TWEAK、NF-κB的mRNA及蛋白表达,且TWEAK与NF-κB的表达下降呈显著性正相关。结论:脑缺血后脑组织中NF-κB及TWEAK的表达显著升高,并呈显著性正相关。大剂量OMT可以改善神经症状,减少脑梗死体积,减轻脑水肿,对局灶性脑缺血具有神经保护作用。大剂量OMT显著抑制了缺血后NF-κB、TWEAK表达的升高。大剂量OMT对NF-κB表达的抑制作用是其神经保护作用的可能机制,TWEAK可能介导了此神经保护机制。