幽门螺杆菌对Balb/c小鼠胃粘膜上皮细胞凋亡增殖及环氧合酶-2表达的影响

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目的用幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)国际标准株NCTC11637感染Balb/c小鼠,观察H.pylori感染初期小鼠胃粘膜上皮细胞动力学的变化并测定小鼠胃粘膜上皮细胞环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的表达,以探讨H.pylori感染对Balb/c小鼠胃粘膜上皮细胞凋亡增殖及COX-2表达的影响,揭示H.pylori的某些致病机制。方法将40只Balb/c小鼠随机分为4组,每组10只,第1组为对照组,第2、3、4组为实验组:用布氏肉汤液体培养基配制新鲜H.pylori菌悬液(1.0×10~9CFU/m1);第1组灌胃布氏肉汤液体培养基,0.3 ml/只/夭,连续5天;第2、3、4组灌胃新鲜H.pylori菌悬液,0.3 ml/只/天,连续5天;于未次灌胃后第10、10、24、32天分别将第1、2、3、4组小鼠处死,进行以下实验:(1)用快速尿素酶试验、Warthin-Starry银染和H.pylori培养做小鼠的H.pylori感染诊断;(2)用免疫组化比较各组小鼠胃粘膜上皮细胞COX-2的表达量;(3)用流式细胞仪检测各组小鼠胃粘膜上皮细胞凋亡率及增殖指数(PI)。结果(1)按照H.pylori感染的科研诊断标准:第1组有0/10只,第2组有10/10只,第3组9/10只,第4组8/10只小鼠检测到H.pylori感染;随着时间的延长,H.pylori感染率逐渐下降;(2)免疫组化结果显示:随着感染时间的延长,小鼠胃粘膜上皮细胞COX-2表达量有升高趋势,第1组与第2、3、4组的表达量有明显统计学差异(P<0.01),第2组与第3、4组表达量也有明显差异(P<0.01),但第3、4组间无明显差异(P>0.05);(3)细胞凋亡检测结果:随着感染时间的延长,小鼠胃粘膜上皮细胞凋亡率有升高趋势,且各组凋亡率两两比较都有显著统计学差异(P<0.01);(4)细胞增殖检测结果:随着感染时间的延长,小鼠胃粘膜上皮细胞PI有升高趋势;PI除第1、2组间无明显统计学差异外(P>0.05),其他各组间均有明显差异(P<0.01)。结论H.pylori感染初期(病变出现前)胃粘膜细胞浆即高表达COX-2;细胞凋亡率与增殖指数也呈现明显上升趋势,并存在显著正相关。实验提示,H.pylori感染所致的上述细胞动力学变化及COX-2的高表达可能与H.pylori的致病机制及其多样性的临床表现有关。
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