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目的:肺移植仍然是治疗晚期肺部疾病的有效手段,脑死亡(brain death,BD)供体是肺移植供体的主要来源,由于BD可直接引起急性肺损伤,这将会直接影响肺移植手术的成功率。有研究报道外源性的胆绿素对脓毒性肺损伤以及多种其它器官损伤均有保护作用,可能与抗炎症反应、抗氧化损伤以及抗细胞凋亡有关。本研究拟探讨外源性胆绿素对BD供体肺移植诱发肺损伤的影响及其可能机制。
方法:本实验分两个部分。第一部分,观察外源性胆绿素对BD肺损伤的影响。雄性Wistar大鼠随机分为3组:sham组,向大鼠颅内置入Fogarty导管,但不膨胀球囊,吸入50%氧气;BD组,向大鼠颅内置入Fogarty导管,膨胀球囊,直至呼吸停止,大鼠吸入50%氧气;BDBV组,BD诱导后30 min确定BD后,吸入50%氧气的同时腹腔注射外源性胆绿素(3.5mg/Kg),观察90 min。每组纳入符合实验要求动物各8只。实验结束放血处死动物,收集血液和肺组织标本。第二部分,观察外源性胆绿素对移植肺功能的影响,切取第一部分3个组的供肺进行异体原位肺移植,移植成功后立即腹腔注射胆绿素(3.5mg/Kg),移植后观察2h结束实验,收集受体血液和移植肺组织标本。每组纳入符合要求动物8对。
结果:第一部分:胆绿素吸入逆转了BD大鼠的Pa02、HCO3和pH值进行性恶化趋势;组织学观察显示胆绿素减轻了BD诱导肺损伤;胆绿素减少了鼠血浆中促炎症细胞因子(TNF-Q,IL-8)水平,并抑制了肺组织中髓过氧化物酶(MPO)的活性;胆绿素降低了肺组织中MDA的含量,升高了SOD的含量;胆绿素减少了肺组织凋亡,增强了BD大鼠BVR蛋白表达。第二部分:胆绿素逆转了受体鼠的PaO2恶化趋势;组织病理学检查显示吸入胆绿素降低了移植肺的肺损伤评分;降低了受体鼠血浆中促炎症因子(TNF-a、IL-8)的浓度,同时抑制了移植肺的MPO的活性;胆绿素显著的降低了肺组织中MDA的含量,升高了SOD的含量;胆绿素治疗显著减少了移植肺的细胞凋亡,胆绿素增加了移植肺中BVR的表达,抑制了移植肺中HO-1和NF-KB的蛋白表达。
结论:BD供体腹腔注射胆绿素对BD肺损伤具有保护作用;BD供体和受体均注射胆绿素对移植后肺功能具有保护作用。这些效应可能是胆绿素通过调节NF-kB及HO-1的表达,发挥抗炎症反应、抗氧化和抗细胞凋亡效应作用的结果。