杨梅汁花色苷的提取分离及其抗氧化、抑菌活性的研究

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杨梅(Myrica rubra Sieb. et Zucc.)是我国的特产水果,因其酸甜适口,风味独特而深受广大消费者的青睐。作为一种主要的杨梅加工产品,杨梅汁具有较好的开发价值和应用前景。杨梅汁中含有丰富的花色苷,本文以杨梅汁中的花色苷为研究对象,比较研究了常规溶剂浸提法、超声波辅助提取法和高压脉冲电场(PEF)辅助提取法提取杨梅汁花色苷的方法,并对提取工艺参数进行了优化;研究了大孔吸附树脂对杨梅汁花色苷的静态吸附工艺,并用紫外-可见光谱法对分离后的花色苷进行了初步的鉴定;研究了杨梅汁花色苷的体外抗氧化活性和抑菌活性。主要研究结果如下:(1)以初提液中花色苷含量为指标,采用单因素试验和正交试验设计,得到常规溶剂浸提法提取杨梅汁花色苷的最佳工艺参数为:乙醇浓度70%,料液比1:12,提取时间80min,提取温度30℃,初提液中花色苷含量为13.876mg/g;超声波辅助提取法提取杨梅汁花色苷的最佳工艺参数为:乙醇浓度90%,料液比1:10,提取功率350W,提取时间30min,初提液中花色苷含量为16.251mg/g;PEF辅助提取法提取杨梅汁花色苷的最佳工艺参数为:乙醇浓度85%,料液比1:8,电场强度21KV/cm,循环次数2次,初提液中花色苷含量为22.043mg/g。三种提取方法相比,PEF辅助提取法既缩短了提取时间,同时还提高了提取产量,故采用PEF辅助提取法进行提取。(2)研究了六种大孔树脂对杨梅汁花色苷的吸附性能与解吸性能,筛选出AB-8为较理想的分离杨梅汁花色苷的树脂,其吸附率为76.34%,解析率为69.23%。采用单因素试验确定了AB-8静态吸附动力学试验参数为:pH=3.0,吸附时间5h,解吸时间2.5h,解吸液为80%浓度的乙醇。分离后花色苷为紫黑色粉末,色价为68.8,回收率为72.41%。(3)采用紫外-可见光谱分析法对杨梅汁花色苷进行简单的分析鉴定,确定了所提取分离的色素为花色昔类物质,花色苷未被酰基化,主要为矢车菊色素-3-葡萄糖苷。(4)研究了杨梅汁花色苷的体外抗氧化活性,以VC为对照,采用总抗氧化能力、超氧阴离子自由基(O2-·)清除能力和羟自由基(·OH)清除能力评价杨梅汁花色苷的抗氧化能力。结果表明:浓度为2mg/mL的杨梅汁花色苷的总抗氧化能力与50μg/mL的VC效果相当;浓度为0.5mg/mL的杨梅汁花色苷的O2-·清除能力与50μg/mL的VC效果相当;浓度为0.2mg/mL的杨梅汁花色苷的·OH清除能力比同浓度的VC清除能力略高。(5)采用圆形滤纸片法,对杨梅汁花色苷的抑菌活性进行初步的研究。研究表明:杨梅汁花色苷对青霉、啤酒酵母没有明显的抑制作用,但是对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌表现出较强的抑菌能力,且抑菌强度随着浓度的增大而增加,杨梅汁花色苷对这4种细菌抑制作用的强弱顺序为:沙门氏菌>大肠杆菌>枯草芽孢杆菌>金黄色葡萄球菌;杨梅汁花色苷对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为:1.25mg/mL、1.25mg/mL、2.5mg/mL、0.625mg/mL。
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