【摘 要】
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植物的成花发育是由一类同源异型基因调控的,这类基因多具有MADS-box结构,因此又称之为MADS-box基因.MADS-box基因编码的转录因子可分为四个明显的区域,即M区、I区、K区和C区
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植物的成花发育是由一类同源异型基因调控的,这类基因多具有MADS-box结构,因此又称之为MADS-box基因.MADS-box基因编码的转录因子可分为四个明显的区域,即M区、I区、K区和C区.其中M区(MADS-box)具有高度的保守性,我们根据此区域的保守序列设计简并性引物,利用RACE的方法从太行花花芽中克隆到了两个MADS-box基因THMADS1和THMADS2.分别以THMADS1不含MADS-box的区段和THMADS2中比THMADS1长出的约300bp片段作模板,用地高辛标记合成反义RNA探针,以各时期花芽(高温处理和正常温度条件下)石蜡切片为材料进行原位杂交,以确定这两个基因的精确表达模式.实验结果表明两探针杂交得到的结果相同,两基因在未经高温处理的花原基就有表达,到花器官原基出现的时期,仅集中在雌、雄蕊中表达.在高温处理过的材料中,这两个基因的表达模式与未经高温处理的花芽是一致的,但基因表达量明显低于未经高温处理的花芽,说明这两个基因在花原基分化及雌、雄蕊分化发育中起着重要的作用,也可能与低温引起雄蕊败育有关.以THMADS1的全长序列构建成正义表达载体,用不含MADS-box的区段构建成反义表达载体,将构建的载体转入农杆菌LBA4404中,对拟南芥和烟草进行了转基因的研究,以分析THMADS1的功能.
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