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研究目的：探讨中药复方PC-SPESⅡ及其成分抑制乳腺癌转移的作用效果及其作用机制。
研究方法：①体内实验采用人乳腺癌MDA-MB-231细胞异种移植瘤裸鼠转移模型,观察PC-SPESⅡ及其成分对裸鼠肺转移结节、瘤体、食欲以及体重的影响;②体外实验采用人乳腺癌MDA-MB-231细胞模型。MTT法检测药物对细胞活力的影响;细胞划痕实验检测用药后细胞迁移力的变化;Transwell小室检测药物对细胞的迁移力和侵袭力的影响;Western blot法检测药物对细胞侵袭、迁移相关蛋白的表达、并探讨其对细胞侵袭、迁移相关信号传导通路的影响。
研究结果：①在异种移植瘤裸鼠肺转移模型中,PC-SPESⅡ250mg/kg组和黄芩素50mg/kg组同模型组相比能够明显抑制乳腺癌细胞的肺转移,复方组抑制效果同阳性对照组紫杉醇10mg/kg组比较没有明显差异。黄芩素抑制效果明显低于复方组和紫杉醇组。动物体重组间没有统计学差异(P＞0.05)。肿瘤重量和体积各用药组同模型组相比均有统计学意义(P＜0.05),复方组、黄芩素组同紫杉醇组相比亦有统计意义(P＜0.05)。紫杉醇组裸鼠有明显的肌肉抽搐、痉挛等疼痛表现和呕吐、便溏等消化道反应。复方组及黄芩素组未见不良反应,动物整体生活状态复方组优于其它组。②在体外人乳腺癌MDA-MB-231细胞模型中,PC-SPESⅡ 及其成分黄芩苷、黄芩素、冬凌草甲素、甘草次酸高剂量作用细胞72h能够明显抑制细胞的活力,中低剂量作用48h内对细胞活力没有明显的抑制作用。同对照组相比较,PC-SPESⅡ0.25、0.5、1μl/mL;黄芩素25、50、100μmol·L-1;黄芩苷50、100μmol·L-1;冬凌草甲素4、8μM;甘草次酸25、50μmol·L-1均能够明显抑制MDA-MB-231细胞侵袭和迁移(P＜0.05)。与对照组相比较,黄芩素50μmol·L-1使有活性的MMP 2表达降低了58％;100μmol·L-1使MMP9和FAK的表达分别降低了81％和69％;25、50、100μmol·L-1均能够明显抑制uPA/uPAR和RhoA的表达,RhoA的表达分别降低了19％、64％、71％,并呈现出明显的剂量依赖关系。50、100 μmol·L-1使ROCK-1的表达分别降低了13％和75％;使NF-κB的表达降低了25％和63％;25、50 μmol·L-1使p-p38MAPK的表达降低了49％和74％。与对照组相比,黄芩苷25、50、100μmol·L-1均能够降低RhoA的表达,25μmol·L-1作用最强,降低了46％;ROCK-1的表达分别降低了37％、22％、53％;25μmol·L-1使FAK的表达降低了39％;100μmol·L-1使NF-κB的表达降低了47％。甘草次酸50μmol·L-1能够明显抑制MMP 2表达,同对照组相比降低了89％。
结论：在人乳腺癌MDA-MB-231细胞异种移植瘤裸鼠肺转移模型中,PC-SPESⅡ250mg/kg组及其有效成分黄芩素50mg/kg组均抑制了乳腺癌细胞肺转移,同时还能够抑制肿瘤生长。复方组及黄芩素组不良反应明显小于紫杉醇组,动物整体生活状态复方组优于其它组;②在体外人乳腺癌MDA-MB-231细胞模型中,PC-SPESⅡ及其成分黄芩素、黄芩苷、冬凌草甲素、甘草次酸能够明显抑制细胞侵袭和迁移。其抑制癌细胞侵袭和转移的机理可能与抑制细胞外基质降解和细胞骨架重组及细胞粘附有关,并且可能与p38MAPK和NF-κB细胞信号传导通路有关。