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[目的]
探索调更汤对去势5月龄SD大鼠下丘脑线粒体衰老的调节作用。
[方法]
采用青年SD雌性大鼠，行去势手术后，模拟绝经状态模型，并通过观察大鼠阴道角化上皮细胞来检验实验模型是否成功。以倍美力作为阳性对照药物，设立调更汤组（中药组）、倍美力组（西药组）、模型组、青年组进行比较研究。在给药8周后，将大鼠处死。观察大鼠下丘脑丙二醛(Maleic Dialdehyde，MDA)含量、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase，SOD)活力、乳酸脱氢酶(Lactatedehydrogenase，LDH)活力、总抗氧化能力(Total Antioxidant Capacity，T-AOC)；下丘脑线粒体DAN（Mitochondrial DNA，Mt-DNA）损伤基因CoⅠ、CoⅢ（Cytochrome oxidaseⅠ、Ⅲ）的mRNA表达；下丘脑雌二醇(Estradiol，E2)、促卵泡生成素(Follicle-stimulating Hormone，FSH)水平；下丘脑UCP2蛋白及其基因(UCP2mRNA)表达；以及电镜观察下丘脑线粒体微观结构来尝试研究调更汤对模拟绝经状态大鼠下丘脑性激素及线粒体损伤的调节作用。
[结果]
1、氧化损伤方面，去势5月龄SD大鼠下丘脑MDA、T-AOC、SOD、LDH水平均有明显的改变。去势后，大鼠下丘脑MDA含量、LDH活力均显著升高(P＜0.01)：大鼠下丘脑SOD活力、T-AOC水平均显著降低(P＜0.01)。经过药物干预后，倍美力能够显著地降低大鼠下丘脑MDA、LDH水平(P＜0.01)，提高SOD、T-AOC水平(P＜0.05)。调更汤亦能够降低大鼠下丘脑MDA、LDH水平(P＜0.05)，提高SOD、T-AOC水平(P＜0.05)。
2、去势5月龄SD大鼠下丘脑Mt-DNA损伤基因CoⅠmRNA、CoⅢmRNA表达均显著升高(P＜0.01)。倍美力和中药调更汤可显著降调大鼠下丘脑Mt-DNA突变基因CoImRNA、CoⅢmRNA表达(P＜0.01)。
3、电镜观察显示，在放大8200倍、43000倍的情况下，可以明确看到模型组大鼠下丘脑神经元细胞的线粒体明显损伤严重，呈现线粒体严重水肿，空泡化明显，内嵴肿胀断裂。与青年组大鼠下丘脑神经元细胞线粒体有明显区别。经过药物干预后，西药组和中药组SD大鼠镜下下丘脑神经元细胞线粒体成不同程度的恢复。线粒体水肿减轻，几乎不见空泡化，内嵴完好。
4、在UCP2蛋白及其基因表达方面，各组大鼠下丘脑的UCP2蛋白及UCP2mRNA水平有明显差异。其中，模型组SD大鼠下丘脑的UCP2蛋白及UCP2mRNA水平显著低于青年组SD大鼠(P＜0.01)。经过药物干预后，西药组下丘脑UCP2蛋白水平较模型组而言有所升高(P＜0.05)，中药组下丘脑UCP2蛋白水平较模型组而言显著提高(P＜0.01)。在下丘脑UCP2mRNA方面，西药组与中药组均较模型组显著提高(P＜0.01)，其中，中药组上升水平要优于西药组。
5、下丘脑内分泌方面，各组大鼠E2、FSH水平有显著差异。模型组大鼠下丘脑E2水平显著低于青年组，差异有统计学意义(P＜0.01)；经药物干预后，倍美力升高大鼠下丘脑E2水平的作用显著(P＜0.01)；中药对大鼠下丘脑E2水平无明显的改善作用(P＞0.05)。模型组大鼠下丘脑FSH水平均显著高于青年组(P＜0.01);经过药物调节后，西药组大鼠下丘脑FSH水平均较模型组显著降低(P＜0.01)，中药对大鼠下丘脑FSH水平无改善作用(P＞0.05)。
[结论]
1调更汤能够提高去势5月龄SD大鼠下丘脑UCP2表达改善下丘脑线粒体氧化损伤。
2调更汤不是通过提升下丘脑E2水平环节改善下丘脑线粒体氧化损伤。