LOX、MMP-2、MMP-9、HIF-1α蛋白在乳腺癌侵袭/转移中的实验研究

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目的:检测LOXmRNA在不同侵袭/转移潜能的乳腺癌细胞的表达,观察不同的乳腺癌细胞在乳腺癌模型的成瘤及转移情况,探索LOX、MMP-2、MMP-9、HIF-1α蛋白在乳腺癌模型中的表达情况,分析LOX与MMP-2、MMP-9、HIF-1α之间的相关性,检测乳腺癌组织的LOX.MMP-2.MMP-9蛋白的表达,结合临床数据进行分析。方法:1.应用RT-PCR检测LOXmRNA在MDA-MB-231细胞、MCF-7细胞表达。2.使用MDA-MB-231细胞、MCF-7细胞、MDA-MB-231(RNAi)细胞建立乳腺癌模型。定期观察裸鼠一般情况、移植瘤大小及瘤重,第7周时取出肿瘤并检查内脏转移情况。S-P免疫组织化学方法检测移植瘤中LOX、MMP-2、MMP-9、HIF-1α蛋白,对数据进行统计学处理.3.收集乳腺癌组织111例,病理证实均为浸润性导管癌,应用免疫组织化学技术检测LOX、MMP-2、MMP-9蛋白,结合临床数据进行统计分析。结果:1.高侵袭转移潜能的乳腺癌细胞MDA-MB-231中LOXmRNA表达量显著高于低侵袭转移潜能的乳腺癌细胞MCF-7(P<0.01)。2.所有裸鼠接种癌细胞后全部成瘤,至6周时取出所有移植瘤。MDA-MB-231组的肿瘤体积.肿瘤重量显著大于MDA-MB-231(RNAi)组(P= 0.000)、MCF-7组(P=0.000),而MDA-MB-231(RNAi)组与MCF-7组(P>0.05)间肿瘤体积、肿瘤重量无差异。MDA-MB-231组有3只裸鼠出现肺转移,其余两组未出现肺转移。3.MDA-MB-231组的LOX.MMP-2、MMP-9、HIF-1α蛋白的表达水平显著高于MCF-7组(P=0.000)、MDA-MB-231(RNAi)组(P=0.000),而LOX、MMP-2.MMP-9、HIF-1α蛋白的表达水平在MCF-7组与MDA-MB-231(RNAi)组(P>0.05)间无差异。移植瘤组织中LOX蛋白与MMP-2(r=0.696,P=-0.000)、MMP-9(r=0.735,P=0.000)、HIF-1a(r=0.737,P=0.000)蛋白呈显著正相关。4.LOX蛋白在不同临床分期(P=0.000)、淋巴结转移(P=0.007)及肿瘤大小(P=0.000)的乳腺癌组织的表达率存在显著差异,但在不同年龄患者的癌组织中LOX蛋白的表达率无差异(P>0.05)。乳腺癌组织中LOX蛋白的表达与MMP-2(r=0.262,P=0.005)、MMP-9(r=O.424,P=0.000)蛋白的表达呈正相关。LOX蛋白与ER(r=-0.257,P=0.007)、PR(r=-0.276,P=0.003)、HER-2(r=-0.225,P=0.017)蛋白呈显著负相关。结论:1.乳腺癌细胞高侵袭/转移的潜能可能与LOX、MMP-2、MMP-9、HIF-1 a的高表达,及其相互之间的协同作用相关。2.LOX促进乳腺癌侵袭/转移的机制与MMP-2、MMP-9促进乳腺癌侵袭/转移的机制可能相同,LOX可能受到HIF-1a的调控。3.LOX表达情况与肿瘤大小、临床分期、淋巴结是否转移有关,而与患者年龄无关。4.LOX的表达情况可能与ER、PR、HER-2的表达有关。
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