【摘 要】
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目的:建立简便、快速、稳定、经济的外周血循环肿瘤DNA提取的固相载体法.通过高灵敏度的荧光染料对所提取的胰腺癌患者外周血循环DNA进行显示并对DNA中K-ras基因作突变分析,
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目的:建立简便、快速、稳定、经济的外周血循环肿瘤DNA提取的固相载体法.通过高灵敏度的荧光染料对所提取的胰腺癌患者外周血循环DNA进行显示并对DNA中K-ras基因作突变分析,初步探讨外周血循环DNA作为新的肿瘤标志物的可能.结论:1.异硫氰酸胍-硅胶法用于提取外周血微量DNA简便、快速、稳定,重复性好,抽提时间小于1小时,提取效果在质和量方面均优于传统SDS/蛋白酶K-酚/仿法.2.新型荧光染料SYBR Green I在微量DNA样品的分析过程中具有低毒、灵敏度高的特点,且使用方法简单,优于传统的EB染色法.3.K-ras基因突变分析显示胰腺癌患者外周血循环DNA具有肿瘤源性,其作为新的肿瘤标志物具有较高的特异性和灵敏度,有较高的临床开发和应用价值.
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