Fe3O4/壳聚糖纳米粒子对溶菌酶吸附行为研究

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溶菌酶由于具有无毒无副作用、抗菌消炎、抗病毒、增强免疫力等优点而在医药卫生和食品工业等方面有着重要的应用,因此,有效的分离提取溶菌酶至关重要。与传统的分离方法相比,磁性吸附分离技术具有选择性、专一性及吸附剂易分离等优点,但是纯的Fe304纳米粒子具有易团聚、生物相容性差等不足。磁性复合粒子能够克服纯纳米粒子的缺陷,因此受到了很多研究者的关注。本课题利用共沉淀法制备了磁性Fe3O4纳米粒子,并对其进行改性得到了Fe3O4/chitosan (Fe3O4/壳聚糖)复合粒子,利用XRD、TEM、TGA、FTIR和等电点测定等手段对Fe3O4/chitosan进行表征。研究了Fe3O4/chitosan对溶菌酶的吸附特征,包括溶液pH值、溶菌酶的初始浓度、温度、接触时间、离子强度等因素对吸附行为的影响;还考察了NaCl溶液(解吸液)的浓度对解吸率的影响和Fe3O4/chitosan的重复利用情况。另外,研究了不同条件下的动力学和热力学行为,主要利用的动力学模型为准一级动力学模型和准二级动力学模型;吸附等温模型为Langmuir、Freundlich和Sips模型。最后,利用红外光谱、紫外一可见光谱、荧光光谱、圆二色谱等手段分析吸附和解吸过程中溶菌酶的构型变化。通过TEM和XRD表征可知,Fe3O4/chitosan为纳米级,并且保持了Fe3O4的尖晶石结构;而TGA和FTIR表征则证明了Fe3O4和壳聚糖两者的复合。溶液pH对吸附有较大的影响,随着pH的增大,Fe3O4/chitosan对溶菌酶的吸附量先增大后减小。在pH=6的磷酸盐缓冲体系中,吸附量随着初始浓度和温度的增加而增加,在310 K时吸附量可达110.79 mg/g;吸附平衡时间为20 h,不受溶菌酶的初始浓度的影响。离子强度对吸附量影响较大,随着离子强度的增大,吸附量先减小后增大,在1.0 mol/L NaCl条件下吸附量达到143.12 mg/g。在解吸实验中,NaCl溶液的浓度为0.5 mol/L时解吸率最高,为97.0%。在循环利用实验中,吸附量逐渐减小,这与解吸率的降低紧密相关。从动力学和热力学的研究结果中可以看出,吸附反应遵循准二级动力学模型,初始吸附速率随浓度的增加而不断增大;Sips吸附等温模型能更好的描述Fe3O4/chitosan对溶菌酶的吸附行为;Fe3O4/chitosan对溶菌酶的吸附为自发的、吸热的、熵增的过程。光谱分析结果证明了在吸附和解吸的过程中溶菌酶的构型未被破坏。
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