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β-防御素(beta-defensin)是机体内一种重要的阳离子抗菌肽分子,在先天性免疫和获得性免疫中具有重要作用。近年来,β-防御素被发现在哺乳动物雄性生殖系统中相对集中表达,在调节精子的功能活性,参与动物有效生殖等方面拥有重要作用。目前有关哺乳动物β-防御素的研究多见于人、小鼠和猕猴等动物,而关于狐β-防御素(vulpes beta-defensins,vBDs)的研究未见报道。本研究利用PCR技术获取蓝狐和赤狐vBD1、vBD108和vBD122基因并对10种vBDs组织分布进行鉴定。荧光定量PCR技术研究蓝狐 vBD1、vBD2、vBD3、vBD108 和 vBD122 基因表达水平并将 vBD1、vBD108 和vBD122基因表达水平与赤狐相对比。荧光定量PCR和免疫组化技术对vBD108和vBD122在弱精症蓝狐生殖组织中的基因表达水平和组织定位进行研究,结果如下:(1)获得蓝狐和赤狐vBD1、vBD108和vBD122基因,cDNA全长分别为207 bp、216 bp和195 bp,分别编码68、71和64个氨基酸,信号肽长度分别为23、19和22个氨基酸。与犬β-防御素基因相比,蓝狐vBD1、vBD108和vBD122基因编码区分别有5、5和4个核苷酸突变位点,其中非同义突变位点数分别为1、3和2个,而赤狐vBD1、vBD108和vBD122基因编码区分别有7、3和3个核苷酸突变位点,其中非同义突变位点数分别为2、2和1。(2)10种vBDs基因在蓝狐和赤狐组织中呈不规则分布,vBD3、vBD108和vBD122主要表达在睾丸和附睾组织中,vBD1和vBD2主要表达在肝脏和肾脏组织中;蓝狐组织中,肾脏和肝脏中vBD1 mRNA表达量显著高于vBD2(P<0.05),睾丸中vBD122 mRNA表达量显著高于vBD3和vBD108,附睾中vBD108 mRNA表达量显著高于vBD3和vBD122(P<0.05),且蓝狐肾脏、肝脏组织中vBD1及睾丸、附睾组织中vBD108和vBD122的mRNA表达量均高于赤狐(P<0.01)。(3)vBD108 mRNA在弱精症蓝狐生殖组织中的表达量关系为:睾丸>附睾头>附睾体>附睾尾(P<0.05),且弱精症蓝狐生殖组织中vBD108 mRNA的表达水平显著低于健康蓝狐,其中附睾体组织内差异最大;vBD122 mRNA在弱精症蓝狐生殖组织中的表达量关系为:睾丸>附睾头>附睾体>附睾尾(P<0.05),且弱精症蓝狐生殖组织中vBD122的表达量显著低于健康蓝狐,其中睾丸组织内差异最大;vBD108主要分布于睾丸的间质细胞、生精细胞、支持细胞及附睾假复层上皮柱状纤毛细胞中,各组织阳性信号强弱为:附睾体>睾丸>附睾头>附睾尾,而弱精症蓝狐生殖组织中vBD108阳性信号均较弱;vBD122主要分布于睾丸的生精细胞、支持细胞,及附睾假复层上皮柱状纤毛细胞中,间质细胞基本无信号,阳性信号强弱为:睾丸>附睾头>附睾体>附睾尾,而弱精症蓝狐生殖组织中vBD122的阳性信号均较弱。