自体白血病树突状细胞疫苗输注安全性观察和增强免疫功能研究

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目的:观察体外诱导的自体白血病树突状细胞(1eukemic-dendriticcell,L-DC)疫苗体内回输的安全性,通过对细胞因子和T细胞亚群的检测,来初步探讨L-DC疫苗对机体免疫状态的影响,以便指导进一步的临床研究。 方法:留取白血病患者未缓解骨髓分离单个核细胞在体外用常规联合因子培养法(GM-CSF+IL-4+TNF-α)诱导制备L-DC疫苗,行流式细胞免疫表型检测进行细胞鉴定。在化疗缓解后的间歇期,白血病患者接受体外诱导的自体L-DC疫苗的静脉回输,每周一次,连续4次,为一个疗程。回输期间及之后两个月观察疫苗输注的临床相关毒副反应。留取患者疫苗第一次回输前及回输后24h外周血,低温分离获取血清,行流式小球微阵列术(cytokinebeadarray,CBA)分析血清中Th1/Th2细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10和TNF-αt的浓度变化,另留取患者第一次疫苗输注前及完成4次疫苗输注后一周内外周肝素抗凝血行多参数三色流式细胞法(flowcytometricmethod,FCM)检测T细胞亚群的表达变化。最后用SPSS11.0软件进行统计学分析。 结果:2003年12月~2005年10月共31例经血液学确诊为白血病的患者入组了本研究,其中20例完成了全部的细胞因子及T细胞亚群检测,可进行评价。体外骨髓单个核细胞常规联合因子培养,成功诱导出自体L-DC疫苗,流式检测高表达成熟DC的免疫表型HLA-ABC,HLA-DR、CD80、CDE86、CD83。在化疗间歇期顺利进行了疫苗的回输,患者耐受性良好,临床未观察到明显的不良反应。第一次DC疫苗回输前及回输后24h比较,血清Th1/Th2因子浓度均升高,其中工L-2、IL-4、IL-6和IFN-γ升高显著,并有统计学意义,(统计量t值分别为-2.576、-2.033、-2.777、-2.053、P值分别为0.010、0.042、0.005、0.040)。疫苗回输前后细胞因子差值比较出现TH1因子优势趋势。T亚群分析显示,CD4+细胞比率,CD4+/CD8+比值及NK比率均升高并有统计学意义(统计量t值为-2.329,-2.267,-2.699,P值为0.031、0.035,0.014)。 结论:常规联合因子培养从体外能成功诱导出L-DC,体内静脉回输自体L-DC疫苗是安全可行的,并在一定程度上激活机体的免疫反应,增强患者的抗肿瘤免疫。
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