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重型颅脑损伤(SHI)后胃肠功能障碍的发生率高达80％，不仅制约早期肠内营养的实施、导致患者营养不良和免疫力低下，还会引起肠道菌群紊乱、细菌易位，诱发全身炎症反应综合征(SIRS)，甚至多器官功能障碍综合征(MODS)。因此，早期防治SHI后胃肠功能障碍对降低相关并发症的发生率具有重要意义。课题组前期研究发现，益生菌能改善SHI后的胃肠功能障碍、促进胃肠动力恢复，但其作用温和。基础及临床研究表明，大承气汤(DCQD)的促胃肠动力效果显著，且具有保护肠黏膜屏障的作用，但其攻下之力颇峻，易使患者出现泻下不止甚至发生阴血亏虚，制约了其在创伤患者中的应用。据此我们推测，大承气汤与益生菌联合应用，能否有促进胃肠动力恢复、保护肠黏膜屏障、防止细菌易位的作用，同时又具有改善肠道菌群紊乱，防止大承气汤泻下过猛的作用，更好地发挥两者在改善SHI患者胃肠功能方面的作用。本实验旨在观察大承气汤与嗜酸乳杆菌(LA)联合应用在SHI小鼠胃肠功能恢复方面的作用效果，期望二者的联合应用可以为临床改善SHI后胃肠功能提供新思路。方法：将150只雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为假伤组、生理盐水(NS)组、DCQD组、LA组、DCQD+LA组、1/2DCQD+LA组。假伤组只开骨窗不进行打击，其余各组均按照改良自由落体法建立SHI模型。每只小鼠每日灌胃两次，其余时间自由饮食水。DCQD组：灌胃量为0.4ml/d。LA组：喂菌量不低于1×1010cfu/d。DCQD+LA组：先给予大承气汤，4h后喂菌，用量同DCQD组和LA组。1/2DCQD+LA组：大承气汤用量减半，LA用法同DCQD+LA组。假伤组和NS组：喂等量生理盐水。分别干预1d、3d、7d后检测血浆二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸、胃动素(MTL)的含量，以及肠上皮occludin蛋白的表达量、小肠ICC数量，观察ICC网络结构和肠神经-ICC-平滑肌(ENS-ICC-SMC)网络形态的变化。结果：1.大承气汤联合嗜酸乳杆菌对SHI小鼠肠黏膜屏障的影响1.1Western blot检测肠上皮occludin蛋白表达量变化与NS组相比，DCQD+LA组在SHI后1d、3d、7d的occludin蛋白表达量均显著升高，1/2DCQD+LA组只在伤后1d升高(P<0.05)。1.2血浆DAO和D-乳酸含量变化LA组、DCQD组和DCQD+LA组DAO伤后3d、7d的含量较NS组显著降低(P<0.05)。LA组和1/2DCQD+LA组D-乳酸伤后1d、3d的含量较NS组降低(P<0.05)；DCQD组和DCQD+LA组D-乳酸伤后1d、3d、7d的含量均显著低于NS组(P<0.05)。2.大承气汤联合嗜酸乳杆菌对SHI小鼠胃肠动力的影响2.1透射电镜技术观察小肠ENS-ICC-SMC网络形态变化SHI后，NS组神经纤维束明显减少，平滑肌细胞肿胀，结构被破坏，ICC突起明显减少或消失，与周围神经纤维束和平滑肌细胞连接松散，ENS-ICC-SMC网络形态严重受损；各用药组的上述情况均有所改善，且DCQD+LA组和1/2DCQD+LA组可见相对完整的网络形态。2.2免疫荧光染色法观察小肠ICC网络结构及数量变化2.2.1ICC网络结构假伤组ICC网络密集；NS组网状结构被破坏，网络明显变稀疏，分支较假伤组少。各用药组ICC网络较NS组明显变致密，且DCQD+LA组用药7d时的网状结构密集程度与假伤组无明显差异。2.2.2ICC数量变化与NS组相比，DCQD组、LA组和1/2DCQD+LA组伤后7d的c-kit阳性细胞数量增多(P<0.05)；DCQD+LA组伤后1d、3d、7d的阳性细胞数量也明显升高(P<0.05)，且其伤后1d、7d的阳性细胞数量较DCQD组和1/2DCQD+LA组均增加(P<0.05)。2.3血浆MTL含量变化与NS组比较，LA组伤后1d血浆MTL含量显著升高(P<0.05)；伤后3d，DCQD+LA组高于NS组和DCQD组(P<0.05)；伤后7d，DCQD组MTL含量较NS组、LA组(P<0.05)和DCQD+LA组(P<0.01)均高。结论：1. SHI后肠上皮紧密连接蛋白occludin表达下降，肠黏膜屏障受损、通透性增高，血浆DAO和D-乳酸含量升高；大承气汤联合嗜酸乳杆菌与单独用大承气汤或嗜酸乳杆菌相比，能更好的提高SHI小鼠occludin蛋白的表达，修复肠黏膜屏障，降低肠黏膜通透性。2. SHI后ICC数量减少、网络结构破坏，ENS-ICC-SMC网络受损，MTL分泌失调，胃肠动力紊乱；大承气汤联合嗜酸乳杆菌在恢复胃肠动力方面较单独用大承气汤或嗜酸乳杆菌时的效果好，可能与二者协同更好的降低SHI小鼠ICC数量减少的程度、修复受损的网络结构，维护ENS-ICC-SMC网络形态完整，调节MTL的分泌有关。3.大承气汤联合嗜酸乳杆菌修复SHI后肠黏膜屏障和改善胃肠动力的效果比半量大承气汤联合嗜酸乳杆菌更好。