【摘 要】
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胸腺素α1(Tα1)和胸腺九肽是胸腺上皮细胞产生的两种多肽。Tα1可以促进和诱导T淋巴细胞的分化和成熟，改变T细胞的亚群。胸腺九肽可促使胸腺前体细胞转变为胸腺细胞和成熟的T
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胸腺素α1(Tα1)和胸腺九肽是胸腺上皮细胞产生的两种多肽。Tα1可以促进和诱导T淋巴细胞的分化和成熟，改变T细胞的亚群。胸腺九肽可促使胸腺前体细胞转变为胸腺细胞和成熟的T细胞，提高外周血T细胞的增殖转化，增加哺乳动物和鸡NK细胞活性。为进一步阐明Tα1和胸腺九肽的作用机理，本论文从细胞和分子水平研究了Tα1和胸腺九肽对离体的鸡脾脏淋巴细胞免疫功能的影响及其信号转导机制。
无菌条件下，从健康墟岗黄鸡取出脾脏，分离淋巴细胞并进行体外培养。先用浓度分别为10μg/mL、1μg/mL、0.1μg/mL的Tα1和100ng/mL、10ng/mL、1ng/mL的胸腺九肽作用8小时，再用20μg/mLConA诱导。采用MTT比色法、RT-PCR相对半定量法和RIA法分别研究了不同浓度的Tα1和胸腺九肽对离体的鸡脾脏淋巴细胞增殖转化、IL-2的基因表达与分泌的影响。在细胞培养液中分别加入终浓度为0.01mol/L咖啡碱、0.005mol/LEDTA、0.001mol/L氯化锂和5μg/mL甲派氟丙嗪后，用10μg/mLTα1和10ng/mL胸腺九肽处理，再用20μg/mLConA进行诱导，研究Ca2+-肌醇磷脂-蛋白激酶系统和cAMP-肌醇磷脂-蛋白激酶系统在Tα1和胸腺九肽调节淋巴细胞免疫功能中的作用，揭示Tα1和胸腺九肽调节免疫功能的信号转导机制。
结果表明，10μg/mL和1μg/mL的Tα1处理细胞8小时，能显著提高脾脏淋巴细胞的增殖转化、IL-2的基因表达与分泌(P＜0.05)，且以10μg/mL浓度的效果最佳；0.1μg/mL的Tα1对脾脏淋巴细胞增殖转化和IL-2的基因表达与分泌无显著作用(P＞0.05)。0.01mol/L咖啡碱处理能显著增强Tα1促进脾脏淋巴细胞增殖转化、IL-2的基因表达与分泌以及培养液中cAMP浓度等作用(P＜0.05)。0.005mol/LEDTA处理能显著抑制Tα1促进脾脏淋巴细胞增殖转化、IL-2的基因表达与分泌(P＜0.05)。0.001mol/L氯化锂处理不影响Tα1提高脾脏淋巴细胞增殖转化率及IL-2的基因表达与分泌。5μg/mL甲派氟丙嗪处理能抑制Tα1对鸡脾脏淋巴细胞的免疫功能影响，但作用不显著(P＞0.05)。上述结果提示，10μg/mL和1μg/mL的Tα1能促进鸡脾脏淋巴细胞的增殖和IL-2的基因表达与分泌，其细胞信号转导途径通过cAMP、Ca2+和PKC信使介导。
10ng/mL和1ng/mL的胸腺九肽处理鸡脾脏淋巴细胞8小时后，能显著提高淋巴细胞的增殖转化和IL-2的基因表达与分泌(P＜0.05)，而100ng/mL的胸腺九肽对脾脏淋巴细胞增殖转化无显著作用(P＞0.05)，对IL-2的基因表达和分泌呈现抑制作用。0.01mol/L咖啡碱能显著增强10ng/mL胸腺九肽提高脾脏淋巴细胞增殖转化、IL-2的基因表达以及上清液中IL-2与cAMP浓度(P＜0.05)。0.005mol/LEDTA处理能显著抑制胸腺九肽提高脾脏淋巴细胞增殖转化和IL-2的基因表达与分泌(P＜0.05)。0.001mol/L氯化锂和5μg/mL甲派氟丙嗪对胸腺九肽的免疫调节作用的影响不明显(P＞0.05)。上述结果提示，10ng/mL和1ng/mL的胸腺九肽能促进鸡脾脏淋巴细胞的增殖和IL-2的基因表达与分泌；胸腺九肽通过cAMP、Ca2+、IP3和PKC第二信使途径发挥免疫调节作用。
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