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目的:探讨当归活性成分阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对人体真皮成纤维细胞(fibroblasts)的表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)表达的影响,为阿魏酸钠作为美容天然添加剂提供实验依据。
方法:无菌条件下取人腹部皮肤,体外分离培养人真皮成纤维细胞,进行免疫细胞化学法(ICC)鉴定细胞类型。四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同浓度的阿魏酸钠作用72h对成纤维细胞增殖的影响,以确定合适的阿魏酸钠实验浓度。然后将细胞随机分为正常对照组,低剂量组,中剂量组和高剂量组。每组设6个复孔(n=6),分别作用24h、48h和72h。用化学比色法测定成纤维细胞培养上清液中还原型谷胱甘肽(reduced glutathione hormone,GSH)水平。ELISA法测定细胞培养上清液中EGF的含量。
结果:1)GSH水平比较:正常对照组不同时间比较无明显差异(p>0.05),小剂量组中72h与24h比较明显升高(p<0.05),与48h比较无明显差异(p>0.05);中剂量组中72h与24h比较明显升高(p<0.01),与48h比较无明显差异(p>0.05);大剂量组中72h与48h比较明显升高、与24h比较显著性升高(p<0.05,p<0.01)。此外,24h小剂量组、中剂量组与对照组比较无明显差异(p>0.05),24h大剂量组较对照组显著性升高(p<0.01),48h小剂量组与对照组比较无明显差异(p>0.05),中剂量组、大剂量组较对照组显著性升高(p<0.05,p<0.01)。72h小剂量组、中剂量组、大剂量组较对照组均显著性升高(p<0.05,p<0.01,p<0.01);2)EGF表达的比较:正常对照组不同时间比较无明显差异(p>0.05),小剂量组中72h与24h比较明显升高(p<0.05),与48h比较无明显差异(p>0.05);中剂量组中72h与24h比较明显升高(p<0.05),与48h比较无明显差异(p>0.05);大剂量组中72h与48h比较明显升高、与24h比较显著性升高(p<0.05,p<0.01)。此外,24h小剂量组、中剂量组与对照组比较无明显差异(p>0.05),大剂量组较对照组显著性升高(p<0.01)。48h小剂量组与对照组比较无明显差异(p>0.05),中剂量组、大剂量组较对照组显著性升高(p<0.01,p<0.01)。72h小剂量组、中剂量组、大剂量组较对照组均显著性升高(p<0.05,p<0.01,p<0.01)。
结论:1)阿魏酸钠可以促进皮肤成纤维细胞培养上清液中GSH生成,这个作用具有显著的剂量依赖性及时间依赖性;2)阿魏酸钠可以促进皮肤成纤维细胞培养上清液中EGF表达,且具有显著的剂量依赖性及时间依赖性;3)阿魏酸钠的美容机理可能部分通过上述作用实现的。