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猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and Respiratory Syndrome，PRRS)又称为“猪蓝耳病”，是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRS virus，PRRSV)引起的。该病流行于世界各国，给养猪业造成了巨大的经济损失。由于其病原极大的变异特性，给PRRS的预防控制带来了极大的困难。我国2006年爆发的“无名高热病”后经证实即为猪繁殖与呼吸综合征病毒的变异株引起的，因此监测毒株的变异情况、建立可靠的检测方法是控制PRRS的关键。 本研究从广东省某发病猪场采集病料，进行了病毒分离，命名为ZQ-GD-2010，该病毒可在Marc-145细胞中稳定传代，并产生明显细胞病变(cytopathic effect，CPE)；可与PRRSV荧光抗体结合，产生特异性荧光。以分离到的毒株ZQ-GD-2010为材料，对其全基因进行序列测定分析，表明该毒株为变异的美洲型PRRSV，与06年我国多个省份流行的高致病性蓝耳病毒株具有极高的核苷酸和氨基酸相似性，与国内分离株DC株相似性最高。 研究还根据猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP7基因设计了一对特异性的引物，构建阳性质粒pMD-XH，以此阳性质粒建立标准曲线，建立了荧光定量PCR检测方法，该方法具有良好的特异性和敏感性，对临床样品的检测与商品化的猪蓝耳病(美洲株)病毒实时荧光PCR检测试剂盒比较，符合率达100％。 为了进一步研究针对猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体的检测方法，将NSP7基因克隆至原核表达载体pET-28a，构建重组质粒pET-28a-Nsp7，再将质粒转化表达菌BL21(DE3)，诱导蛋白表达，并对蛋白进行了相关特性分析和Western-Blot鉴定，结果显示Nsp7为可溶蛋白，且能与血清中PRRSV抗体特异性结合，具有较好的抗原性；利用Nsp7融合蛋白作为包被抗原建立的间接ELISA检测方法，通过各ELISA条件的优化，结果表明Nsp7的最佳包被浓度为2.0ug/100uL，血清的最佳稀释度为1:80，HRP标记的鼠抗猪Ig(H+L)的最佳稀释度为1:2000。重复性试验和特异性试验结果表明本研究建立的ELISA方法重复性好，特异性强。选取113份猪血清，通过与IDEXX公司ELISA试剂盒比较，结果表明本研究中的间接ELISA方法检测到90份阳性，IDEXX公司ELISA方法检测到106份阳性，共同阳性数为90，共同阴性数为7，总符合率为85.8%。