【摘 要】
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毒性重金属污染已成为世界性的重大环境和人体健康问题。尤其是土壤重金属污染,它通过食物链对人类造成的危害是不容忽视的。植物修复无疑是治理土壤重金属污染最有前
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毒性重金属污染已成为世界性的重大环境和人体健康问题。尤其是土壤重金属污染,它通过食物链对人类造成的危害是不容忽视的。植物修复无疑是治理土壤重金属污染最有前途的治理方式之一。然而,已知的超富集植物大多数倾向于生长速度慢、生物量低。
本实验研究材料长喙田菁(Sesbaniarostrata)是一种源于非洲热带的豆科植物,与Azohizobiumcauliaodons共生,形成茎瘤和根瘤。固氮效率很高,是良好的水田绿肥。长喙田菁具有生长速度快、生物量大、生长周期短、固氮能力强、耐受高浓度的锌、铅、铜、镉等多种重金属、可作为铅锌尾矿废弃地植被重建的先锋植物等特性,使之成为重金属污染土壤的修复植物是有前途的。但长喙田菁对重金属的富集能力不强,所以,期望通过转基因技术获得对重金属具有高富集能力和耐性的长喙田菁。
在重金属污染胁迫下,植物会启动不同防御机制来降低重金属离子对细胞的毒害。其中,植物络合素是一类富含Cys的多肽化合物,能以Cys的巯基与重金属发生络合作用而实现解毒功能。此类物质是由植物络合素合酶催化合成的。
本研究克隆了长喙田菁植物络合素合酶(Sesbaniarostrataphytochelatinsynthase,SrPCS)的全长cDNA及其基因,并构建了其中一个SrPCScDNA酿酒酵母表达载体。同时尝试建立长喙田菁植株再生体系及其农杆菌介导的转化体系,为进一步在长喙田菁中过量表达SrPCS基因奠定基础。通过实验获得以下结果:1、分离、克隆得到了长喙田菁植物络合素合酶(SrPCS)基因及其四个cDNA。2、构建了含SrPCS4cDNA酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)表达载体,并转化到了酿酒酵母INVScⅠ中。3、采用四种方法尝试建立长喙田菁植株再生体系,筛选出具有子叶节的胚轴作为外植体.
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