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本研究首先以黄瓜子叶法为基础,以化学药剂为材料,建立番茄灰霉病药剂筛选体系,分别从不同黄瓜品种、不同叶龄、不同菌龄、不同培养条件、不同施药方法等方面进行测试,针对灰霉病菌建立了简便、快速的杀菌剂生测方法。该体系可概括为:黄瓜选用对Botrytis cinerea Pers.中等感病品种长春密刺,叶龄为8 d左右,菌龄1 d的幼龄菌丝,喷雾法施药,0.5%水琼脂保湿,24℃光照培养,接种后24～36h测量结果。应用此法首先测试了4种化学药剂,2%恩泽霉水剂、25%菌思奇乳油、50%速克灵可湿性粉剂和40%施佳乐悬浮剂对番茄灰霉病的防治效果,检验了测试体系的稳定性,在此基础上,利用该体系从3株植物内生菌中筛选到一株对灰霉病菌有强烈抑制作用的菌株Eb-28菌株,该菌株由番茄茎分离获得。对Eb-28菌株培养条件的研究表明,培养温度、培养时间、培养基的酸碱度以及通气量对菌株生长都有影响,确定其最佳培养条件为:30℃下培养时间为48 h,初始pH值为6.0,通气量为175 mL/250 mL。采用常规方法结合分子生物学方法对Eb-28菌株进行了鉴定。根据Eb-28菌株的形态特征、培养性状以及生理生化反应,结合伯杰氏细菌鉴定手册（第八版）,初步将此菌株鉴定为芽孢杆菌属。16S rDNA序列分析表明Eb-28菌株的16S rDNA序列与枯草芽孢杆菌同源性为99%,最终鉴定其为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。本研究表明,Eb-28菌株在离体叶片上对番茄灰霉病病斑扩展抑制率为51.68%。该菌株的发酵滤液对灰霉病菌抑菌圈直径达到20 mm以上,经121℃灭菌的滤液则无抑菌圈产生,说明发酵液中的活性成分在121℃灭菌后失活。显微观察发现,发酵液中活性物质可造成病原菌菌丝体原生质凝结,菌丝体畸形,不正常膨大。内生菌Eb-28菌株粗蛋白的提取采用（NH4）2SO4分级盐析法,（NH4）2SO4饱和度为60%时抑菌活性最高,抑菌圈直径达25 mm。且上清液无活性,可见活性物质均已被沉淀,为蛋白类物质。显微观察发现,抑菌圈周围受抑制菌丝畸形,原生质凝结,与发酵滤液对菌丝的影响一致。进一步研究发现,此粗蛋白抑菌活性在近中性至碱性条件下（pH值6.6～10.6）抑菌圈直径均达到20 mm以上,pH值在6.6以下粗蛋白抑菌活性显著降低。粗蛋白经40,60,80℃处理后,抑菌活性与4℃对照无显著差异,其抑菌圈直径均在20 mm以上。100℃处理20 min后粗蛋白抑菌活性与对照相比显著下降,抑菌圈直径为16 mm。经紫外线处理12 h后,抑菌活性与对照相同,抑菌圈直径均为21 mm。结果表明,粗蛋白在80℃以下有很好的热稳定性,在100℃时稳定性下降,且此粗蛋白在紫外光下稳定性良好。