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目的:探讨建立牙周病实验动物模型的方法和影响因素;研究混悬液中薄荷醇(L-Menthol)以及替硝唑(TNZ)的浓度与替硝唑经粘膜吸收的渗透效应和储库效应之间的关系;观察体外实验中含薄荷醇的混悬液对药物抗阿米巴原虫效果的影响;制备含薄荷醇的替硝唑混悬剂,用于治疗SD大鼠牙周病模型的体内试验。
方法:1.牙周病实验动物模型的建立建立齿龈内阿米巴原虫(Entamoebagingivalis,E.g)引起的牙周病实验动物模型。
2.薄荷醇对替硝唑经蛙皮吸收的影响以替硝唑为模型药物,研究薄荷醇在促透试验中对其透粘膜吸收的渗透效应和储库效应的影响。
3.含薄荷醇的替硝唑混悬液体外抗齿龈内阿米巴原虫的效果把适量的不同浓度的含或不含薄荷醇的替硝唑混悬液分别加入LES双相培养基中继续培养E.g,观察两组混悬液对原虫生长繁殖的抑制效果。再用高倍镜观察试验前后E.g数量、形态变化。
4.含薄荷醇的替硝唑混悬剂的药效学试验把牙周病动物模型随机分成正常组、模型组、替硝唑混悬液治疗组、含薄荷醇的替硝唑混悬液治疗组,比较四组牙周病指数的变化,测定血清SOD和牙龈组织匀浆SOD的值,并在光学显微镜下观察各组牙龈组织的病理切片。
结果:1.采用四格表统计分析,统计结果显示两种不同的实验动物模型造模方法之间存在着显著的差异(P<0.01),E.g组的造模方法优于普通造模方法组。
2.不同浓度的替硝唑混悬液组的渗透系数之间的差异显著(P<0.05),1%的TNZ混悬液的渗透速率最高;各组间储库效应的差异无显著(p>0.05)。含薄荷醇的替硝唑混悬液组与1%的替硝唑混悬液对照组相比,不同浓度的渗透系数之间的差异显著(P<0.05)。与对照组相比,0.2%的薄荷醇在实验中的储库效应最佳(P<0.01);其它两组的储库效应较低。
3.两组抑制原虫率之间存在着非常显著性差异(P<0.01),含薄荷醇的替硝唑混悬液组的原虫抑制率高于单纯使用替硝唑混悬液组的效果。
4.在体动物实验结果发现齿龈出血指数、血清SOD值的组间差异不显著(P>0.05)。菌斑指数和牙周袋深度、牙龈匀浆SOD的值在各组间比较时发现组间差异显著(P<0.05)。
结论:1.E.g组与普通方法组两种不同的实验造模方法相比,差异存在显著性。10×40倍光镜下观察病理切片发现E.g造模方法组的病理特征更显著。
2.比较不同浓度的含有薄荷醇的替硝唑混悬液的促透效应,发现药物的渗透效应与促透剂薄荷醇的浓度不成比例。在一定的浓度范围内,低浓度组薄荷醇(0.1%)的促透效率反而较高。
3.在体外试验中,比较替硝唑混悬液组和含薄荷醇的替硝唑混悬液组抗E.g的效果,两组原虫抑制率之间存在着显著性差异(P<0.01)。含薄荷醇的替硝唑混悬液组的抑虫率高于单纯使用替硝唑组的抑虫率。在光镜下观察可见E.g在试验前后的形态变化明显。
4.含薄荷醇的替硝唑混悬剂能够抑制寄生于牙龈组织表面或深部的E.g。E.g感染牙龈组织后未造成全身感染。菌斑指数和牙周袋深度、牙龈匀浆SOD的值在各组间比较时发现组间差异显著(P<0.05)。