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目的：本课题通过检测喉鳞状细胞癌组织与正常中的miRNA-129-5p的表达的差异，研究其在喉鳞癌组织中表达与喉鳞癌患者某些的临床指标间关系，并通过体内体外实验研究其对喉鳞癌细胞生长及凋亡的影响，为喉癌发生发展的机制及喉癌临床治疗的发展提供理论基础。 方法：通过RealtimePCR法检测在喉鳞癌标本和正常组织标本中miRNA-129-5p的表达情况，分析miRNA-129-5p的表达和喉鳞癌患者某些临床指标是否具有相关性。荧光素酶法测定结肠腺瘤性息肉病(adenomatous polyposiscoli，APC)基因是否为miRNA-129-5p的靶基因。体外培养喉癌Hep-2细胞，以慢病毒为载体，将反义miRNA-129-5p(ASO-miR-129-5p)转染Hep-2细胞。荧光电镜及Real-time PCR法评估转染效率。我们用CCK8法对各组细胞转然后的增殖情况进行了检测。此外，我们应用Boyden小室法对各组细胞转然后的细胞侵袭能力的变化进行了检测。流式细胞仪检测细胞凋亡发生率、观察细胞周期的变化。Western blot法检测各组APC、c-myc、细胞周期蛋白D1(clyclinD1)蛋白表达情况。建立喉癌裸鼠动物模型，将ASO-miR-129-5p转染移植瘤。电镜观察肿瘤超微结构变化。用TUNEL法检测了治疗组和对照组移植瘤组织中细胞的凋亡情况。免疫组织化学法检测各组移植瘤细胞中APC、c-myc、clyclinD1蛋白的表达情况。 结果：Real-time PCR对喉鳞癌组织及邻近喉正常黏膜进行检测发现miRNA-129-5p在喉鳞癌组织中表达水平显著高于其对应正常黏膜组织(P＜0.05)。荧光素酶实验在基因水平上确定APC为miRNA-129-5p的靶基因。利用慢病毒为载体于体外向Hep-2细胞转染ASO-miR-129-5p后，荧光电镜下观测转染效率超过80％，Real-time PCR法证实ASO-miR-129-5p转然后Hep-2细胞后，细胞中miR-129-5p水平较对照组明显下降(P＜0.05)。通过CCK-8实验研究发现ASO-miR-129-5p转染喉鳞癌hep-2细胞后对喉癌细胞的生长有明显的抑制作用。Boyden小室法检测到转染后ASO-miR-129-5p治疗组Hep-2细胞的侵袭能力较对照组明显下降(P＜0.05)。流式细胞仪检测到在Hep-2细胞里下调miR-129-5p表达后，引起了细胞周期阻滞于G0/G1期，并诱导了Hep-2细胞的凋亡。Western blot法检测发现以ASO-miR-129-5p下调Hep-2细胞miR-129-5p表达后，和对照组相比，APC蛋白表达水平明显升高，c-myc及clyclinD1蛋白的表达明显下降(P＜0.05)。在喉癌裸鼠移植瘤模型实验中，ASO-miR-129-5p治疗组移植瘤的体积及重量小于对照组，移植瘤的生长受到抑制。透射电镜观察到ASO-miR-129-5p治疗组移植瘤内大量细胞出现细胞核固缩、碎裂，染色质向边缘聚集、线粒体内出现大量空泡样改变、形成了凋亡小体等典型细胞凋亡的超微结构变化。TUNEL法检测证实ASO-miR-129-5p治疗组中细胞凋亡显著高于对照组。免疫组织化学法显示，与对照组相比，ASO-miR-129-5p治疗组移植瘤组织中APC蛋白的表达升高，而c-myc、clyclinD1蛋白的表达明显减弱。 结论：本研究证实ASO-miR-129-5p可以有效地抑制喉鳞状细胞癌Hep-2细胞的生长，并诱导其凋亡;在喉癌中miR-129-5p通过对靶基因APC的调控起着癌基因的作用。miR-129-5p也许可以作为喉鳞状细胞癌基因治疗的新靶点。