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喹赛多(Cyadox)是一种新型的喹噁啉类药物，对猪、牛、禽、鱼等动物具有抗菌促生长作用。该药物在动物体内广泛代谢，生成多种代谢物。本文建立了同时检测喹赛多及其主要代谢产物N1脱一氧喹赛多、N4脱一氧喹赛多、脱二氧喹赛多(Dcya)、喹噁啉-2-羧酸(QCA)的高效液相色谱质谱连用分析方法，并运用非线性混合效应模型(NONMEM)法研究喹赛多及其四个主要代谢产物的群体药动学特征，为喹赛多合理给药方案的制定提供科学的依据。
收集不同生长阶段猪141头，其中公猪70头，母猪71头，日龄范围为18～121d，体重范围为3.3～63.2kg。每头猪按照40mg/kgbw的剂量灌服喹赛多，于给药前采集一次空白血清和血浆，血清用于测定每只猪丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、总胆红素(TBIL)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、尿素(BUN)、肌酐(CREA)等9项生化指标，血浆则作为空白血样。给药后随机采血，每只猪采样2～4次，分离出血浆，用高效液相色谱质谱联用法测定血浆中的喹赛多及其代谢产物N1、N4、Dcya、QCA的药物浓度。血浆样品处理如下：准确吸取0.5mL血浆于2mL的塑料离心管中，沿管壁缓缓加入乙腈0.5mL，漩涡1min，混匀后12000r/min离心10min，上清液过0.22μm滤膜后，供HPLC-MS/MS进行检测。检测色谱条件为：Luna C18柱，流速200μL/min，柱温35℃，梯度洗脱。质谱条件：电喷雾离子源(ESI)，负离子扫描，多反应监测模式(MRM)，电喷雾电压(IS)-4200V，雾化气压力(GS1)45psi，辅助气流速(GS2)55L/min，气帘气压力(CUR)20psi，离子源温度(TEM)650C，碰撞室压力(CAD)8psi。在上述检测条件下能较好地分离喹赛多及其四个主要代谢产物N1脱一氧喹赛多、N4脱一氧喹赛多、脱二氧喹赛多(Dcya)和喹噁啉-2-羧酸(QCA)，样品中无其他内源性杂质的干扰，血浆中喹赛多及其代谢产物N1、N4、Dcya和QCA的最低检测限均为0.5ng/mL。
采用NONMEN软件处理药时数据，进行模型拟合和群体药动学参数的估算，并考察体重、日龄、性别、血清生化指标等固定效应对喹赛多及其代谢产物N1、N4、Dcya、QCA的群体药动学参数的影响，获得药动学参数，并得到最终回归模型。本试验发现猪灌服40mg/kgBW喹赛多后，猪血浆中只能检测到少量的原型药物，药物吸收不典型。使用NONMEM软件中的一室模型(ADVAN2 TRANS2)和二室模型(ADVAN4TRANS4)对数据进行拟合，模型均不能收敛。血浆中N1脱一氧喹赛多、N4脱一氧喹赛多，脱二氧喹赛多以及喹噁啉-2-羧酸的达峰时间在5～8h，达峰浓度低；在给药后2h内，大部分观测浓度均维持在10ng/mL以下。该四种代谢产物的群体药动学数据用KOKA一室模型得到最佳的拟合。把体重、性别和血浆生化指标加入到KOKA模型中全量回归模型的建立(前向筛选和后向剔除)，结果表明体重对QCA在猪体内的CL/F、V2/F有明显影响。N1脱一氧喹赛多的表观清除率CL/F、中央室分布容积(V/F)、吸收速率常数(Ka)的群体典型值分别为1030L/h,4100L和0.06/h。N4脱一氧喹赛多的表观清除率CL/F、中央室分布容积(V/F)、吸收速率常数(Ka)的群体典型值分别为849L/h，3520L和0.06/h。脱二氧喹赛多(Dcya)的表观清除率CL/F、中央室分布容积(V/F)、吸收速率常数(Ka)的群体典型值分别为349L/h，1850L和0.06/h。喹噁啉-2-羧酸(QCA)的表观清除率CL/F、中央室分布容积(V/F)、吸收速率常数(Ka)的群体典型值分别为285L/h，2596L和0.06/h。
用自举法(Bootstrap)对模型进行验证，结果显示Bootstrap求算的估算均值和95％的置信区间与原模型的估算均值和置信区间都较为接近，说明本次研究建立的PPK模型稳定，预测功能良好。