【摘 要】
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中药复方灌注液(专利号：ZL2010 10132974.7,中国)由瓜子金、紫花地丁、黄芪、半枝莲等11味中药组成,临床用于治疗奶牛乳房炎,具有良好的抑菌、抗炎、解热镇痛及增强免疫的作用
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中药复方灌注液(专利号：ZL2010 10132974.7,中国)由瓜子金、紫花地丁、黄芪、半枝莲等11味中药组成,临床用于治疗奶牛乳房炎,具有良好的抑菌、抗炎、解热镇痛及增强免疫的作用。由于中药方剂具有复杂的化学成分,采用单一的方法对其活性成分进行逐个分离鉴定十分困难。通过对该组方的分析与研究,本试验首先建立了同时测定其中4种不同有效成分咖啡酸、秦皮乙素、绿原酸、芦丁的高效液相色谱(HPLC)检测方法,同时采用高效液相色谱质谱(HPLC-MS)法对其进行验证,并对该组方的指纹图谱进行了进一步研究,为制定该中药制剂的质量标准提供参考依据。试验结果如下：1.同时测定中药复方灌注液中4种有效成分的HPLC方法的建立通过不同色谱条件对比,确定高效液相色谱检测方法。色谱柱：WatersC18分析柱(4.6 mm×150 mm,5μm),Phenomenex保护柱；流动相：乙腈(B)—5 mL/L冰醋酸(C)；洗脱方式：梯度洗脱(0→18 min,B5％→17%,C95%→83%;18 min→30 min,B17%→23%,C83%→77%；30→60 min,B23%→35%,C77%→65%;60 min→65 min,B35%→5%,C65%→95%)。流速：1.0mL/min:检测波长：325 nm；柱温：30℃。在该方法下标准品和供试品均能得到有效分离,可满足同时测定绿原酸、秦皮乙素、咖啡酸、芦丁4种有效成分含量的要求。2.HPLC-MS方法的建立所有试验均采用电喷雾离子源(ESI),正、负离子检测。离子喷雾电压,4000V；毛细管温度,300℃；鞘气流速,40 m/s；辅气流速,10 m/s；毛细管电压,45V；管透镜电压,10V；扫面范围,100-1000 m/z；采用正、负铺全离子扫描方式采集数据。通过Roadmap HompPage工作软件对所得到质谱图进行分析研究,获得各主要峰的保留时间及对应的相对分子质量。3.中药复方灌注液的薄层鉴别运用薄层色谱法对复方灌注液中的紫花地丁、青皮和香附进行鉴别。结果发现供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,均显相同颜色的荧光主斑点。4.中药复方灌注液有效成分的测定采用已建立的高效液相色谱法对制备的复方灌注液有效成分进行测定,结果表明本复方灌注液中绿原酸、秦皮乙素、咖啡酸和芦丁的平均含量分别为0.2483 mg/g. 1.1757 mg/g、0.3071 mg/g和1.8551 mg/g。
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