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脾虚证是临床常见的中医证候之一,主要是以消化系统为主的多系统多器官的功能低下。脾阴虚证是脾虚证众多证型中的一种,多为内伤气血所致,进而导致机体各脏器间的平衡遭到破坏,最终导致菌群失调。本课题从大鼠粪便中直接提取肠道菌群总DNA,用ERIC及16S rDNA引物对其进行扩增,检测肠道菌群的总体存在及变化情况,分别建立在一定条件下健康动物肠道菌群ERIC-PCR及16S rDNA-RFLP的指纹图谱;采用番泻叶水煎剂加甲状腺素建立脾阴虚证动物模型,比较模型动物与健康动物的肠道菌群的变化,得到脾阴虚证模型动物的基因组指纹图谱,确定脾阴虚证相关分子生物学指标,包括ERIC-PCR特征条带340bp的净面积、丰度及菌群相似性指数;16S rDNA-RFLP HaeⅢ/HinfⅠ酶切图谱特征条带460bp/360bp的丰度及菌群相似性指数。采用所建立的分子指标分别比较四君子汤、理中汤、补中益气汤及益胃汤四种方剂对脾阴虚证的治疗作用,结果显示四君子汤、理中汤、补中益气汤中剂量疗效较好,而益胃汤并无明显治疗作用。为进一步确定与脾阴虚证相关的菌群,分别对3个特征条带(340bp、460bp和360bp)进行克隆鉴定,并探讨其相关生理作用。肠道菌群的基因指纹图谱能较全面的反映肠道菌群的整体变化状况,具有同期性。本课题通过采用ERIC-PCR及16S rDNA-RFLP技术对脾阴虚大鼠肠道菌群变化进行的研究,体现出现代生物技术与传统中药的研究相结合的理论和应用价值。