论文部分内容阅读
十字花科蔬菜是华南地区栽培规模最大的蔬菜种类之一，在华南地区的周年供应及出口创汇中占有重要地位。炭疽病(Colletotrichum higginsianum Sacc．)和霜霉病(Peronospora parasitica(Pers．)Fries)是华南地区十字花科蔬菜生产中的重要病害，常对十字花科蔬菜生产造成严重影响。目前生产上主要靠频繁喷雾化学杀菌剂防治蔬菜病害，不仅防治成本高，而且造成环境污染和农药残毒的问题令人担忧。为了探索利用植物内生菌防治十字花科蔬菜病害的生物防治途径，本研究以十字花科蔬菜为材料，采用组织分离法分离十字花科蔬菜内生菌，并对从十字花科蔬菜内生菌中筛选出的3株拮抗菌进行了分类鉴定以及生物学特性、抗菌谱、定殖能力、消长动态、寄主范围、防病效果等方面的研究，主要研究结果如下：
1．从菜心(Brassicaparachinensis L．H．Bailey)、小白菜(Brassica chinensis L．)、芥蓝(Brassica albograbra L．H．Bailey)、芥菜[Brassicajuncea(L．)Czern．et Coss]和萝卜(Raphanus sativus L．)等十字花科蔬菜上共分离到43株内生细菌和13株内生真菌，其中在菜心和小白菜体内分别分离到12株和16株细菌。通过平板对峙法和抑菌圈法筛选出3株对菜心炭疽菌、辣椒疫霉菌和辣椒软腐病菌等10种植物病原菌有较强拮抗作用的内生细菌CX-PS、CX-PA和XBC-PS。
2．通过菌体形态、菌落培养性状和生理生化反应测定，CX-PS被鉴定为洋葱假单胞菌(Pseudomonas cepacia)，CX-PA被鉴定为多粘类芽孢杆菌(Paenibacilluspolymyxa)，XBC-PS被鉴定为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)。CX-PS最适生长温度为30℃，最适生长pH值为7.5，致死温度为75℃10 min。CX-PA最适生长温度为30V，最适生长pH值为7.0，致死温度为75℃10 min；XBC-PS最适生长温度为20～30℃，最适生长pH值为8.0，致死温度为65℃10 min。3株内生细菌均可利用多种碳源和氮源，在4℃下保存寿命为180天，在28℃下保存寿命为90天。
3．利福平抗性和抗病原菌标记测定结果表明，经浸种和喷雾接种处理后，3个菌株CX-PS、CX-PA和XBC-PS均能进入菜心和小白菜体内。浸种接种，3个菌株在植株体内的消长动态相似，呈现先升后降的趋势。喷雾接种，3个菌株在叶片和茎中的消长趋势基本相似，都有两个峰值，而在叶柄中的定殖动态有所不同。CX-PS在菜心叶片和茎中的定殖量均在第3天和第9天达到高峰，在菜心叶柄中呈先波动上升，再逐渐下降的趋势；CX-PA在菜心叶片中的定殖量在第3和第9天达到高峰，而在茎中的定殖量却在第5和第9天达到高峰，在菜心叶柄中呈先升，后降再升的趋势；XBC-PS在小白菜叶片中的定殖量在第3和第7天达到高峰，在茎中的定殖量在第3和第13天达到高峰，在小白菜叶柄中呈先上升达到第一个高峰后，逐渐下降，到第13天又出现一个较小的峰，之后下降。由此可见，3个菌株在植株体内不仅可以定殖，而且具有传导能力。
4．通过人工浸种和喷雾接种，CX-PS可在菜心、小白菜、大白菜[Brassicapekinensis(Lour.)Rupr.]、辣椒(Capsicum annuum L．)、番茄(Lycopersicon esculentumMill.)、豇豆[Vigna unguiculata(L.)Walp．]、黄瓜(Cucumis sativus L．)、丝瓜[Luffacylindrica(L.)Roem.]、甜瓜(Cucumis melo L.)、香瓜(Cucumis chinensis Pangala)、番木瓜(Caricapapaya L.)、龙眼(Dimocarpus longon Lour.)植物体内定殖；CX-PA可在菜心、小白菜、大白菜、辣椒、番茄、黄瓜、丝瓜、甜瓜、香瓜和番木瓜植物体内定殖，但不能在豇豆和龙眼体内定殖；XBC-PS可在菜心、小白菜、大白菜、辣椒、番茄、黄瓜、丝瓜、豇豆、甜瓜、香瓜和番木瓜植物体内定殖，但不能在龙眼体内定殖。
5．在盆栽防治试验中CX-PS、CX-PA和XBC-PS均对菜心炭疽病和小白菜霜霉病有明显的防治效果，喷雾接种处理比浸种接种处理的防病效果好。在接种病原菌前24 h喷施拮抗菌培养液的防病效果较好，对菜心炭疽病的防效分别为58.94％、56.63％和62.80％；对小白菜霜霉病的防效分别为55.47％、60.86％和67.32％。将CX-PS与XBC-PS混合使用可提高其防治效果，对菜心炭疽病的防效为66.33％，对小白菜霜霉病的防效为70.23％。
十字花科蔬菜内生菌是一个混合的复杂菌群，利用这些内生菌控制植物病害是一种潜在而丰富的生防资源。CX-PS、CX-PA和XBC-PS生长适应性强，抗菌谱和寄主范围广，对菜心炭疽病和霜霉病均有较好的防治效果，具有潜在的生防应用价值。