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研究目的:体外培养人牙龈成纤维细胞（human gingival fibroblasts,HGFs）,通过real-time qPCR、酶联免疫吸附测定（Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA）检测低能量激光疗法（low level laser treatment,LLLT）对牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,P.g）脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）刺激下HGFs分泌白介素-1β（Interleukin-1β,IL-1β）、细胞间粘附因子-1（Inter cellμLar adhesion molecμLe1,ICAM-1）、单核细胞趋化蛋白-1（CCL2）及转录因子c-Jun、c-Fos及NF-κB的影响,从分子水平进一步阐明牙周疾病的致病机理及低能量激光辅助抗炎的作用机制,为进一步揭示牙周病的病理机制和激光辅助牙周治疗提供理论依据。研究方法:选择天津医科大学口腔医院颌面外科门诊2017年08月至10月就诊的需要拔除阻生齿的患者,获得患者知情同意后,在术中收集用于原代培养的牙龈组织,所取组织无明显炎症。（1）组织块法培养原代HGFs,显微镜下观察其生长状况,经传代后取第3代细胞进行免疫组化染色进行来源鉴定,取4-6代细胞进行实验。（2）用浓度10μg/mL的P.g LPS刺激HGFs,在0h、2h、4h、6h、8h及24h时间点分别提取HGFs的总mRNA,观察各时间点IL-1β、ICAM-1、CCL2、c-Jun、c-Fos、NF-κB mRNA表达的情况,并选取各因子表达的峰值时间点,作为下一步实验的基础。（3）实验分组:空白对照组、LPS组、LPS+LLLT组,分别予以DMEM、10μg/mL P.g LPS、10μg/mL P.g LPS+5J/cm2 LLLT处理,在各炎症因子表达峰值时间点提取各组HGFs的总mRNA及培养液,观察炎症因子及转录因子的表达情况。（4）real-time qPCR检测HGFs中IL-1β、ICAM-1、CCL2、转录因子c-Jun、c-Fos及NF-κB的mRNA表达水平;ELISA检测培养液中IL-1β、ICAM-1、CCL2的蛋白表达。（5）采用SPSS 23.0统计软件进行统计分析;计数资料以均数±标准差表示;组间比较采用独立样本t检验,取p<0.05时认为有统计学差异。结果:（1）可观察到原代培养约1周后有细胞从组织块中爬出,形态呈长梭形。细胞抗波形丝蛋白染色阳性,抗角蛋白染色阴性,结合取材部位,证实所培养细胞为来源于中胚层的人牙龈成纤维细胞。（2）real-time qPCR结果显示,在10μg/mL P.g LPS刺激下,人牙龈成纤维细胞中炎症因子IL-1β、ICAM-1、CCL2及转录因子c-Jun、c-Fos及NF-κB的mRNA表达升高,转录因子c-Jun、c-Fos及NF-κB的mRNA表达量在2h达峰值;IL-1β、CCL2、ICAM1的mRNA表达量在8h为最高值。（3）real-time qPCR结果显示,与单独P.g LPS刺激相比,P.g LPS+LLLT处理后人牙龈成纤维细胞中炎症因子IL-1β、ICAM-1、CCL2及转录因子c-Jun、c-Fos及NF-κB的基因表达明显降低,且有统计学差异（p<0.05）;ELISA结果显示,与单独P.g LPS刺激相比,P.g LPS+LLLT处理后人牙龈成纤维细胞表达IL-1β明显降低,且有统计学差异（p<0.05）,P.g LPS+LLLT处理后人牙龈成纤维细胞表达ICAM-1、CCL2降低,但没有统计学差异（p>0.05）。结论:（1）牙龈成纤维细胞受到P.g LPS刺激能合成分泌多种细胞因子发挥免疫炎症反应,炎症因子IL-1β、ICAM-1、CCL2及转录因子c-Jun、c-Fos及NF-κB在牙周炎的发生发展中起重要作用。（2）LLLT可降低炎症HGFs模型中炎症因子IL-1β、ICAM-1、CCL2及转录因子c-Jun、c-Fos及NF-κB的表达,抑制病原微生物在牙周炎致病过程中所起的作用,产生抗炎作用。