木瓜蛋白酶制备抗人肝癌单抗F（ab’）2及Fab片段

• 作 者: 仇凯 陈志南 刘智广 王茜 何风昌 曲萍 米力 隋延仿 刘彦仿
• 出 处: 第四军医大学学报
• 发表日期: 1995年06期
• 关键词: 抗体 单克隆 木瓜酶 离子交换色谱法 肝肿瘤
• 基金项目: 国家863生物高技术资助课题

目的：为了制备肝癌ＭｃＡｂＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ’）＿２及Ｆａｂ片段，方法：用激活的木瓜酶分别在偏酸性（ｐＨ５．５）和偏碱性（ｐＨ８．０）条件下消化１８ｈ和１ｈ得到Ｆ（ａｂ’）＿２和Ｆａｂ片段，经ＤＥＡＥ－４０ＨＲ阴离子交换色谱柱在Ｗａｔｅｒｓ６５０Ｅ快速蛋白液相色谱系统（ＥＰＬＣ）上建立其相应的纯化方法。结果：该法制备Ｆ（ａｂ’）＿２得率为４３％～６２％，制备Ｆａｂ得率４２％，其活性用免疫荧光法测定均为１．３６×１０￣（－９）ｍｏｌ／Ｌ。结论：本法操作简单，实用性强，尤其制备Ｆ（ａｂ’）＿２产率及活性均优于胃蛋白酶法。