PCB153对人B淋巴母细胞系基因表达谱的影响

来源 :浙江省医学科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jigmei123
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目的:  研究2,2,4,4,5,5-六氯联苯(2,2,4,4,5,5-hexachlorobiphenyl,PCB153)对人B淋巴母细胞基因表达谱的影响,筛选获得差异表达基因,并验证体外筛测获得的差异表达基因在多氯联苯高污染地区人群外周血中的表达改变。  方法:  采用0(对照)和25、100、200μM的PCB153分别处理人B淋巴母细胞2、24、48 h,收集细胞后提取总RNA。PCB153处理24 h的RNA样本用Illumina人HT-12 v4全基因组表达谱芯片筛测差异表达基因,并对差异表达基因进行基因GO(geneontology)分类分析。在PCB153处理2、24、48 h样本中用实时定量PCR对候选差异表达基因进行验证。  采集32例电子垃圾拆解地居民和48例对照人群外周血样,提取总RNA,用实时荧光定量PCR检测候选差异表达基因的表达水平。  结果:  芯片结果显示,各剂量PCB153处理样本中分别发现161、191、1006个差异表达基因,三个剂量组重叠差异表达基因数为15个,其中,上调基因4个、下调基因11个。选取6个差异表达基因用定量PCR进行验证,发现2个上调基因(CCDC92和TMEM175)及3个下调基因(CCL22、STK38L和GZMK)的表达改变与芯片结果一致。CCDC92、CCL22、GZMK和TMEM175等可影响多种淋巴细胞功能,STK38L可作用于细胞周期和细胞凋亡等,CCL22和MTDH的异常表达则与多种癌症密切相关。  拆解地居民CCL22基因的表达水平明显低于对照组(为对照组的66.7%,P=0.016),而GZMK和MTDH基因的表达水平则显著高于对照组(为对照组的144.9%、163.3%, P=0.048,0.032)。  结论:  体外急性染毒PCB153干扰了人B淋巴母细胞某些重要功能基因的表达,芯片筛测和定量PCR验证均表明,PCB153可致人B淋巴母细胞系CCDC92和TMEM175基因表达上调,CCL22、GZMK和STK38L三个基因的表达下调。  CCL22、GZMK和MTDH三个基因在该多氯联苯高污染地区人群中表达异常。与对照组人群相比,CCL22表达显著下调,GZMK和MTDH表达显著上调。
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