AMPK及其下游基因与有氧运动能力相关分子标记筛选及功能研究

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研究目的:通过分析AMPK及其下游基因多态性在我国北方汉族长跑运动员中的分布特征,筛选与长跑能力相关的分子标记;通过与长跑训练前后生理指标的关联分析,筛选与长跑训练敏感性相关的分子标记;通过研究多态位点的生物功能,阐明多态位点不同基因型在表达调控上的作用,为解释分子标记与有氧运动能力的关系提供实验依据。研究方法:1、利用MALDI-TOF技术和Genescan技术解析AMPKα2、MEF2A、PFK2、TORC2、ACC-β、CPT-1β、HSL等基因17个SNP、2个STR多态位点在长跑运动员和普通人中的分布特征,分析基因多态性与长跑能力的相关性;2、利用MALDI-TOF技术解析AMPKα2、CPT-1β基因9个SNP位点在男性青年中的分布特征,分析基因多态性与长跑训练前后生理指标变化的关联性;3、利用基因重组、细胞转染等分子生物学方法研究Glut4基因启动子区与有氧耐力关联的rs5418位点携带不同等位基因的启动子对报告基因表达活性的影响。结果与结论:1、基因多态性与长跑能力相关性分析结果显示:(1)AMPKα2基因rs2796516位点G等位基因可能是优秀女子长跑运动员的分子标记;rs2746342-rs11206889位点AC单体型可能是男子优秀长跑运动员的分子标记,CC单体型可能是女子5/10km运动员的分子标记。(2)HSL基因第六内含子处(CA)n重复多态当以4重复次数为分割点划分短链和长链等位基因进行比较时,LL基因型可能是5/10km运动员的分子标记。2、基因多态性与长跑训练敏感性指标的相关性分析结果显示:(1)AMPKα2基因:rs1418442的AA型、rs11206889的CC型与部分单体型的LVMI指标,以及部分单体型的IVSD指标和部分单体型150W时SVI指标的训练敏感性最高。(2)CPT-1β基因:rs131758的AA型的HR/RE.PWS指标、rs131758-rs470117(AT)单体型安静时SVI、T、COI指标训练敏感性最高。以上基因型/单体型可能是长跑训练敏感性分子标记。3、rs5418位点携带A等位基因的重组载体中报告基因相对活性显著高于携带G等位基因的重组载体,说明其部分生物学活性在于不同等位基因能显著改变启动子活性,从而影响Glut4基因表达活性
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