饲粮纤维对生长中期草鱼生产性能、消化吸收能力和肠道健康的作用及其机制

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本试验通过研究生长中期草鱼摄食不同水平纤维(以中性洗涤纤维NDF计)的饲粮对生产性能、消化吸收能力、肠道免疫功能和物理屏障(肠道抗氧化能力、细胞凋亡和紧密连接)的影响,探索饲粮纤维对草鱼生长和肠道健康的作用及其机制,并确定生长中期草鱼饲粮纤维需要量。选取体重相近的健康草鱼540尾(初重123.00±0.70g),并随机分到6个处理(3个重复/处理)的18个网箱中,分别饲喂含不同水平饲粮纤维(NDF分别为9.78、11.90、14.02、15.94、18.12和20.16%)的半纯合饲粮,试验周期为60天,考察饲粮纤维对草鱼消化吸收能力、肠道抗氧化损伤能力和紧密连接的作用及机制。从生长试验每个处理分别选取24尾鱼,通过腹腔注射嗜水气单胞菌攻毒6天,考察饲粮纤维对草鱼肠炎发病率、肠道黏膜免疫功能和细胞凋亡的作用及机制。另外选取540尾体重为215.81±2.12g的健康草鱼,随机分到18个网箱中(6个处理,3个重复),分别饲喂添加了0.5%三氧化二铬的试验饲粮,为期7天,探究饲粮纤维对草鱼饲粮表观消化率的影响。以上试验结果表明,与低纤维组(NDF=9.78%)和高纤维组(NDF=20.16%)相比,适宜水平饲粮纤维提高了生长中期草鱼采食量、饲料粗蛋白表观消化率、饲料效率(FE)、增重百分比(PWG)和特异性生长率(SGR)(P<0.05),提高了草鱼的生产性能;同时肝胰脏和肠道中消化酶(如胰蛋白酶等)以及前、中、后肠刷状缘酶(如γ-谷氨酰转移酶等)的活力均显著提高(P<0.05),促进了草鱼对营养物质的消化吸收。进一步研究发现,适宜水平饲粮纤维显著降低了生长中期草鱼肠炎发病率(P<0.05),增强了肠道健康,这可能与其增强肠道物理屏障和免疫功能有关。适宜水平饲粮纤维(1)通过Nrf2/Keap1信号途径显著提高了生长中期草鱼前、中、后肠抗氧化酶(如超氧化物歧化酶等)基因表达和酶活力,增加了还原型谷胱甘肽含量(P<0.05),增强了肠道抗氧化能力,同时抑制了肠道中活性氧的产生,;(2)上调了肠道抗凋亡因子(Bcl-2、IAP和Mcl-1)的基因表达(P<0.05),下调了caspase-3、-8、-9、凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)、脂肪酸合成酶配体(FasL)和B-细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)的基因表达(P<0.05),抑制了细胞凋亡;(3)通过下调肌球蛋白轻链激酶基因表达上调各肠段闭锁小蛋白(ZO-1)以及occludin、claudin-f和claudin-11等紧密连接蛋白的基因表达(P<0.05),保证了草鱼肠道细胞间结构完整性;(4)增加了草鱼肠道中溶菌酶和酸性磷酸酶活力,提高了补体C3、C4和免疫球蛋白IgM含量(P<0.05),通过NF-κB信号途径上调了Mucin2和LEAP-2B等抗菌肽、抗炎细胞因子TGF-β1 mRNA水平,下调了促炎细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-12p40和IFN-γ2)基因表达,缓解了肠道炎症反应,增强了草鱼肠道黏膜免疫功能。综上所述,适宜水平饲粮纤维(NDF)通过增强草鱼肠道物理屏障和免疫功能,降低草鱼肠炎发病率,促进消化吸收能力,最终提高生长中期草鱼的生产性能。在本试验条件下,以PWG和肠炎发病率为标识,确定生长中期草鱼(123-467g)饲粮中纤维(以NDF计)需要量分别为14.39%和16.42%。
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