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目的：
脊髓损伤(SCI)病变严重,致死率、致残率很高,给患者、家庭和社会造成极大的痛苦和负担。急性SCI包括原发性和继发性损伤,原发性损伤系外界作用因素直接损伤脊髓组织,通常不可逆,继发性损伤通过某些措施可以预防和部分逆转。微循环障碍、炎症因子释放以及自由基损伤等是SCI继发性损伤的重要病理机制,探讨这些机制对于预防SCI继发性损伤、促进损伤后脊髓功能恢复有重要意义。
糖皮质激素(Gc)可能减轻炎症和水肿,减少压迫,降低炎症因子、自由基等有害物质的产生与释放,临床上已开始尝试大剂量甲基强的松龙(MP)冲击治疗急性脊髓损伤,具体机制尚不清楚。超氧化物歧化酶(SOD)是氧化还原酶,催化过氧化物阴离子和氢产生氧分子与过氧化氢,保护细胞对抗过氧化物,减少过氧化损伤。乙酰胆碱酯酶(AChE)来源于运动神经元胞体,通过轴突快速运输到达神经终末;组织化学中,AChE在运动终板处表达,其表达水平可反映运动终板退变及再生情况。
本研究中制作大鼠脊髓半横断模型,早期甲基强的松龙(MP)干预。研究目的其一是通过检测脊髓匀浆、血液中SOD活性,初步探讨MP对大鼠脊髓损伤后脊髓、血液中SOD活性的影响。本研究目的其二是通过检测腓肠肌运动终板处AChE的表达,初步探讨肝对大鼠脊髓损伤后运动终板AChE水平的影响。
材料与方法：
一、MP对大鼠脊髓损伤后脊髓、血液中SOD活性的影响
成年健康雄性Wistar大鼠共96只,随机分为假手术组(A组,n=16)、脊髓半横断组(B组,n=40)和脊髓半横断后MP治疗组(C组,n=40),C组脊髓半横断术后即注射MP。A组术后第1d处死取材,作为对照标本。B组和C组分别于术后1d、3d、1w、2w、4w随机各取8只大鼠,高度水溶性四唑盐(WST-1)法检测脊髓匀浆、血浆中SoD活性。
二、MP对大鼠脊髓损伤后腓肠肌运动终板AChE表达的影响
实验动物及分组同第一部分。A组术后第1d处死取材,作为对照标本。B组和C组分别于术后1d、3d、1w、2w、4w随机各取8只大鼠,铜.铁氰化物改良染色法检测腓肠肌运动终板中AChE表达。
结果：
一、MP对大鼠脊髓半横断术后脊髓、血液中SOD活性的影响
大鼠脊髓半横断术后脊髓匀浆中SOD活性短期(1d)明显上升,随即(3d-4w)缓慢、恢复性下降;脊髓半横断术后早期MP干预,脊髓匀浆中SOD活性进一步提高,但随时间变化趋势类似于无MP干预的脊髓损伤大鼠。脊髓半横断术后1d、3d、1w,脊髓匀浆中SOD活性均表现为C组＞B组＞A组(P均＜0.05)。术后2w,脊髓匀浆中SOD活性表现为C组＞B组或A组(P均＜0.05);B组与A组无差异(P＞0.05)。术后4W,脊髓匀浆中SOD活性表现为C组＞A组(P＜0.05);B组与C组、B组与A组之间均差异(P均＞0.05)。
大鼠脊髓半横断术后血浆中SOD活性短期(1d)明显上升,随后(3d-4w)亦呈缓慢、恢复性下降;脊髓半横断术后早期MP干预,血浆SOD活性进一步提高,但随时间变化趋势类似于无MP干预的脊髓损伤大鼠。脊髓半横断术后1d、3d,血浆SOD活性均表现为C组＞B组＞A组(P均＜0.05)。术后1w,血浆SOD活性表现为C组或B组＞A组(P均＜0.05),B组与C组间无差异(P＞0.05)。术后2w、4w,3组间血浆SOD活性无统计学差异(P均＞0.05)。
二、MP对大鼠脊髓半横断术后腓肠肌运动终板AChE表达的影响
大鼠脊髓半横断术后腓肠肌运动终板AChE的表达在术后3d明显下降,随后(1w-4w)呈缓慢恢复、上升趋势;术后早期MP干预,腓肠肌运动终板AChE表达的下降趋势类似于无MP干预的脊髓损伤大鼠,但随后(1w-4w)恢复趋势快于无MP干预的脊髓损伤大鼠。脊髓半横断术后1d,3组大鼠腓肠肌切片中AChE染色区的平均光密度值无差异(P＞0.05):术后3d,B、C组AChE染色区平均光密度值均＜A组(P均＜0.05),B、C组间无差异(P＞0.05);术后1w、2w,AChE染色区平均光密度值表现为A组＞C组＞B组(P均＜0.05):术后4w,A、C组AChE染色区平均光密度值均＞B组(P均＜0.05),A、C组间无差异(P＞0.05)。
结论：
大鼠脊髓损伤后,脊髓、血浆中SOD活性阶段性增高;脊髓损伤后MP早期干预,其脊髓、血浆中SOD活性阶段性增高更加明显,在脊髓匀浆中表现更为明显,这可能与MP降低继发性脊髓损伤作用有关:脊髓、血浆中SOD活性呈线性相关,血浆中SOD活性可反映脊髓组织中SOD活性。
大鼠脊髓损伤后运动终板处AChE水平阶段性下降:脊髓损伤后MP早期干预,其运动终板处AChE水平阶段性下降后,较早呈上升趋势,可能有助于骨骼肌运动功能的恢复。