肺炎链球菌5型荚膜多糖的获取、纯化及检定

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根据正交试验设计表L<,9>(3<4>)设计的试验条件组合进行了9次肺炎链球菌5型的发酵,提取了肺炎链球菌5型荚膜多糖粗糖。结果显示:为了获得最高的荚膜多糖粗糖收量,最佳的发酵培养条件组合为:温度37℃、葡萄糖20克/升、大豆胨15克/升、pH值7.3。 在此筛选得到的最佳条件下,进行了连续5次肺炎链球菌5型的发酵与荚膜多糖提取。结果表明荚膜多糖粗糖的平均收率为808.6mg/L,相对标准偏差为3.84%,说明该条件组合适合用于肺炎多糖疫苗的研究和生产。 对肺炎链球菌5型荚膜多糖的纯化进行了优化研究。最佳的纯化条件组合为:冷酚抽提三次、沉核酸乙醇浓度23%、超滤膜孔径50kD、最终沉糖乙醇浓度60%。 通过对多糖分子量的测定、肺炎链球菌5型多糖的鉴别试验以及对其各项成分含量的测定来对肺炎链球菌5型荚膜多糖进行检定,最终获得的荚膜多糖各项指标均符合欧洲药典肺炎链球菌多糖疫苗的检定标准
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