淫羊藿苷对人子宫内膜异位症细胞MMP-2、MMP-9表达的影响

• 作 者: 王坤雅
• 机 构: 南昌大学
• 出 处: 南昌大学
• 发表日期: 2016年期
• 关键词: 子宫内膜异位症(Endometriosis EMs) 淫羊藿苷(Icariin ICA) 基质金属蛋白酶-2(Matrix Metalloproteinase

目的:探究淫羊藿苷(Icariin,ICA)是否可以影响子宫内膜异位症(Endometriosis,EMs)在位内膜间质细胞的增殖及其MMP-2、MMP-9的表达,是否能为EMs的治疗及新药合成开辟一条新的思路。方法:1、体外培养30例原代人正常子宫内膜间质细胞(以下简称正常内膜细胞),设为对照组;同理培养30例原代EMs在位内膜间质细胞(以下简称EMs细胞),设为实验组,再将实验组分为不加药物干预组及药物干预组。观察细胞生长形态并进行细胞免疫组化鉴定;2、用MTT法探究浓度不同的ICA(分别为25、50、100、200μg/ml)对实验组的EMs细胞增殖的影响,选取最佳浓度进行下一步处理;3、用MTT法测定的最佳有效浓度培养药物干预组EMs细胞24小时,其余组不作处理,随后进行ELISA法检测。收集实验组及对照组细胞上清液,并比较EMs细胞MMP-2、MMP-9蛋白分泌与正常内膜细胞之间的差异性,及经ICA处理前后EMs细胞分泌MMP-2、MMP-9蛋白的差异性;4、同ELISA法分组培养处理人EMs细胞及正常内膜细胞后,提取各组细胞RNA,通过RT-PCR法检测MMP-2、MMP-9mRNA的表达,并比较EMs细胞MMP-2、MMP-9mRNA的表达与正常内膜细胞之间的差异性,及经ICA处理前后EMs细胞表达MMP-2、MMP-9mRNA的差异性。结果:1、体外实验结果显示,EMs细胞分泌表达MMP-2、MMP-9蛋白及mRNA较正常内膜细胞有异常升高,差异有统计学意义,P<0.05。2、MTT法结果显示ICA(25、50、100、200μg/ml)能不同程度的抑制人EMs细胞的增殖能力。浓度为25μg/ml的实验组抑制率为5.26%,抑制作用不明显。将各浓度组相互比较可发现与100μg/ml浓度组相比,当浓度为50μg/ml,两者组间差异P<0.05且P<0.01;而200μg/ml浓度组与100μg/ml的组间差异为P=0.86,差异无统计学意义,故而我们选择终浓度为100μg/ml的ICA进行后续的实验研究。3、加入ICA(100μg/ml)培养EMs细胞24h后,经过药物干预过后的EMs细胞MMP-2、MMP-9蛋白及mRNA的相对表达量较未加药处理组减少,其差异具有统计学意义,P<0.05。结论:ICA可以抑制EMs细胞的增殖,并能下调EMs细胞关于MMP-2、MMP-9蛋白及mRNA的表达,从而减弱了EMs细胞在异位组织器官的侵附、增殖能力。