2,2’,4,4’-四溴联苯醚(BDE-47)对两种海洋微藻的毒性效应研究

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多溴联苯醚(polybrominated diphenyl ethers, PBDE)是一类具有生态风险性的新型持久性有机污染物,自上世纪70年代以来被用作溴化阻燃剂和添加剂,广泛应用于保护电子产品、纺织品和泡沫等塑料制品。多溴联苯醚可以通过渗出或者挥发等方式进入到环境中,且具有的迁移性、蓄积性和持久性等特点,这些特点决定了这类化合物不仅在环境中长期残留,而且可以进行生物富集和放大,从而影响生物体的正常生理活动,其对海洋环境的影响也引起了国内外研究人员的广泛关注,因此评价研究PBDEs在环境中的行为十分必要。但是,目前有关PBDEs对海洋微藻的毒性效应鲜见报道,因而无法客观评价此类化合物的海洋生态风险性。微藻是海洋生态系统的初级生产者,其种类多样性和生物量影响海洋生态系统的结构功能,在食物链中具有非常重要的作用,同时具有对毒物敏感、繁殖快和易获得等优点,能在短时间内得到污染物对其种群及世代的影响研究,是较为理想的指示生物。本文选用了环境中含量较高、分布较广泛的PBDEs的代表性同系物—2,2’,4,4’-四溴联苯醚(2,2’,4,4’-Tetrabromodiphenyl Ether, BDE-47)作为研究对象,以常见海洋微藻叉鞭金藻(Dicrateria inornata)、中肋骨条藻(Skeletonema costatum)、三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)、小球藻(Chlorella vulgaris)为受试生物,研究了BDE-47对四种海洋微藻的急性毒性效应,得到BDE-47对四种微藻的96 h半效应浓度(96 h-EC5o)。在此基础上,研究了不同浓度BDE-47作用下叉鞭金藻(Dicrateria inornata)、中肋骨条藻(Skeletonema costatum)的叶绿素荧光参数(Fv/Fm、Fv/Fo、rETR、ΦPSII)、光合色素(叶绿素a (Chl-a)、叶绿素c(Chl-c)和类胡萝卜素(Car))含量、可溶性蛋白含量、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)活性和丙二醛(Malondialdehyde, MDA)含量的变化,以及藻细胞形态的变化,以探讨BDE-47对海洋微藻的致毒机理。主要研究结果如下:(1)BDE-47对叉鞭金藻和中肋骨条藻的96 h-EC5o值分别为163 μg·L-1和648648μg·L-1, BDE-47对叉鞭金藻属于极高毒性物质,而对中肋骨条藻属于高毒性物质;在可助溶浓度范围内未能检测到BDE-47对三角褐指藻和小球藻96h-EC50。BDE-47对四种微藻的毒性大小顺序为:叉鞭金藻>中肋骨条藻>三角褐指藻)小球藻。(2)中肋骨条藻的光合特性指标Fv/Fm、Fv/Fo、rETR、ΦPSII均随着BDE-47浓度升高而显著降低;BDE-47对叉鞭金藻的光合特性指标影响与浓度和胁迫时间有关。低浓度BDE-47对叉鞭金藻的Fv/Fm、Fv/Fo值起促进作用,而高浓度的BDE-47对叉鞭金藻的Fv/Fm、Fv/Fo、OPSII则起抑制作用,显著低于对照组;24 h时叉鞭金藻的rETR、ΦPSII随着BDE-47浓度的升高而降低,而rETR值到48 h和72 h恢复到对照组水平,ΦPSII值则到96 h恢复到对照组水平。(3)低浓度(50μg·L-1~100 μg·L-1)的BDE-47对中肋骨条藻的Chl-a、Chl-c、Car含量的无显著影响,而中、高浓度(200μg·L-1~600μg·L-1)污染物的影响则体现为Chl-a、Chl-c、Car的含量显著增加,且随着BDE-47浓度的增加而增加;低浓度(25 μg·L-1~50μg·L-1)的BDE-47对叉鞭金藻的Chl-a、Car含量没有显著影响,能促进Chl-c的合成,而高浓度(150μg·L-1~200μg·L-1)的BDE-47能够抑制三种色素的合成。(4)各浓度组BDE-47对中肋骨条藻的可溶性蛋白含量呈诱导-抑制的时间变化趋势,而对叉鞭金藻则主要表现为诱导作用。48h内各浓度组中肋骨条藻和叉鞭金藻SOD酶活性均被显著诱导;72h后较低浓度组两种微藻SOD酶活性均恢复到对照组水平,而较高浓度BDE-47污染下,中肋骨条藻SOD活性被显著诱导,叉鞭金藻SOD活性则被显著抑制。BDE-47胁迫72h后,各浓度组中肋骨条藻和叉鞭金藻MDA含量均显著高于对照组,并且诱导率随BDE-47浓度增加而增加。(5)扫描电镜结果显示,随着BDE-47浓度的增大,两种藻细胞形态均受到破坏,出现细胞破碎、失水、鞭毛脱落等现象。透射电镜结果表明,对照组叉鞭金藻细胞器清晰均匀分布在基质中,而BDE-47处理下,叶绿体皱缩,类囊体排列散乱,线粒体数目增加,细胞基质变浑浊,表明细胞器受到严重损伤。
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