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鸭病毒性肝炎(DVH)是雏鸭的一种急性致死性传染病,其病原是鸭肝炎病毒(DHV)。在2000年前,国际病毒分类委员会(ICTV)将DHV分为3个独立血清型,其中1型DHV(DHV-1)的流行范围最为广泛,致病性最强。现已证明2型DHV(DHV-2)及3型DHV(DHV-3)均为禽星状病毒。近年来,在中国、韩国、台湾地区等均有新型鸭肝炎病毒(N-DHV)发病流行的报道。为更好地防制DVH的广泛流行,对现有DHV的抗原性进行鉴定具有重要意义。本研究使用易感鸭胚和鸭胚原代肝细胞(DELC)对在我国不同年代不同地区分离的9株DHV进行传代培养。传代适应后的病毒具有较稳定的滴度,能够致死鸭胚并产生特异性病变和产生明显的细胞病变。利用血清交叉中和试验和8日龄雏鸭被动保护试验,对病毒的血清型进行鉴定参照同属微RNA病毒的口蹄疫病毒的血清型及亚型划分标准,计算不同毒株之间的亲缘值(R值),对其抗原相关性进行判定。结果表明,GD株与DHV-1标准株的R值<0.47%,YN29株与DHV-1标准株的R值为100%;GD株为N-DHV,YN29为DHV-1。用标准DHV-1抗血清和N-DHV抗血清对国内分离的7株DHV进行交叉中和试验,结果表明,PLK株和YB3株为DHV-1,YB1、YB2、YB5、HY2和HY3株为N-DHV。同时对病毒的抗原相关VP1基因进行扩增和测序。对VP1基因的核苷酸序列与推导的氨基酸序列分析表明,PLK株等3个DHV-1毒株的氨基酸序列同源性为95%左右,GD株等6个N-DHV毒株的氨基酸同源性为98%左右；DHV-1毒株与N-DHV毒株间氨基酸同源性为72-77%。参照同属微RNA病毒的人肠病毒的血清型分型标准,通过对DHV VP1基因序列同源性比较,判定9株病毒的血清型。依据VP1基因序列同源性进行的血清型分型结果与根据抗原性鉴定进行的血清型分型结果一致。同血清型病毒株的VP1基因变异很小,说明DHV的抗原性稳定。同型不同毒株VP1基因的差异,可以导致病毒在致病力、细胞感染能力等方面的差异。目前我国有两种独立的血清型DHV流行,尚未见血清型亚型的流行。本试验对在我国分离的3株N-DHV进行了全基因组序列测定和分析,参考GenBank公布的DHV-1及N-DHV各毒株的基因组全序列,对DHV遗传进化关系进行分析。我国的N-DHV与韩国N-DHV的VP1基因核苷酸序列同源性在94-95%,属同一基因型；而与DHV-1及台湾N-DHV毒株的同源性分别为72-77%和80%,亲缘关系较远,属不同的基因型。对病毒3D(RNA依赖的RNA聚合酶)保守序列绘制的遗传进化树得到同样的结论,我国N-DHV毒株与韩国N-DHV处于同一进化群。对DHV基因组结构进行分析表明,3株N-DHV基因组结构具有典型的微RNA病毒科病毒的结构特征,同时还具有许多独特之处。