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EPA（二十碳五烯酸），是ω-3家族中主要的多不饱和脂肪酸（PUFAs）。研究表明：EPA不仅能增强记忆与思维能力、促进智力发育、抵抗炎症、提高免疫力，降低血脂，预防动脉粥样硬化、脑血栓、脑溢血、高血压等疾病，而且还能明显诱导肿瘤细胞的凋亡，在抗炎、抗肿瘤方面有显著作用。但现行EPA的制备方法以鱼油为原料具有很多不足，近年来已经有人开始研究利用海藻油提取分离多烯脂肪酸的工艺方法。本文以有“药物藻类”之美誉的小球藻为原料，建立了总脂提取、皂化、尿素包合法富集多不饱和脂肪酸、再经甲酯化后，分别采用硝酸银硅胶柱和十八烷基硅烷键合硅胶（ODS）柱纯化技术，得到高纯度的EPA的工艺过程，并对其相关问题进行了探讨研究。本文首先建立了3种不同的检测方法：薄层色谱法（TLC）、气相色谱法（GC）和气质联用色谱法（GC-MS）相结合，能够快速准确的对EPA进行定性定量分析。同时对小球藻油进行了理化性质检测和脂肪酸的基本组成分析。粗脂经过皂化-尿素包合法分离后，其中EPA的含量从19.14%提高到54.03%。将得到的多不饱和脂肪酸衍生化后，获得以EPA甲酯（EPA-ME）为主要成分的混合多不饱和脂肪酸甲酯。进一步纯化采用硝酸银硅胶柱或ODS柱。在硝酸银硅胶柱分离工艺中，讨论了流速、上样量对EPA甲酯纯度的影响。并按照优化后方案进行了工艺放大实验，可以获得纯度为98.88%EPA甲酯，收率为6.4%；纯度91.29%的EPA甲酯，收率为13.68%。在ODS柱分离工艺中，讨论了柱径比、上样量对EPA甲酯纯度的影响。并按照优化后方案进行了工艺放大实验，可以获得纯度为84.02%EPA甲酯，收率为5.09%；纯度为64.43%EPA甲酯，收率为11.04%。此外，我们还研究了EPA甲酯的理化性质、稳定性及抗菌活性。结果表明：EPA甲酯的理化性质与其他多烯脂肪酸酯相似；EPA甲酯在-20℃和-80℃都有很好的稳定性；同时脂肪酸甲酯对四种细菌（大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌和绿脓杆菌）都有一定的抑制效果。