【摘 要】
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目的:明确抑癌基因ARHI在人结肠癌细胞株及组织标本的表达情况,并统计分析其表达异常与结肠癌患者临床病理特征之间的相关性;初步研究ARHI基因在结肠癌细胞中的功能,从而为更
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目的:明确抑癌基因ARHI在人结肠癌细胞株及组织标本的表达情况,并统计分析其表达异常与结肠癌患者临床病理特征之间的相关性;初步研究ARHI基因在结肠癌细胞中的功能,从而为更深入的研究和早期结肠癌的基因诊断及分子靶向治疗提供新的思路和理论依据。
材料方法:本研究通过收集肠癌石蜡标本及培养结肠癌细胞株,利用Western-blot、免疫组化等方法验证细胞及人体组织中ARHI基因的蛋白水平,同时利用体外培养建立稳定转染ARHI-siRNA和空载质粒PU6的HCT-116人结肠癌细胞株,通过CCK-8、划痕试验、Transwell小室及流式细胞术等方法初步研究ARHI基因对人结肠癌细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡的影响。
结果:ARHI基因在人正常结肠组织标本广泛表达,而在相应的结肠癌癌旁组织标本表达下调或缺失,通过半定量评分的方法统计比较分析后发现ARHI表达在两组间存在明显统计学差异(P＜0.001);对实验组49例结肠癌组织实验结果统计分析发现ARHI蛋白表达与肿瘤的分化程度及TNM分期有关(P＜0.05),而与患者的年龄、性别、肿瘤发生部位、大小、大体类型、是否淋巴结转移及神经、脉管浸润与否、是否伴有息肉均无明显统计学差异。通过建立稳定转染ARHI-siRNA基因的结肠癌细胞株,利用CCK-8、划痕试验、Transwell及流式细胞分析等方法检测表明,与转染空载PU6质粒的细胞相比,在人结肠癌HCT-116细胞稳定转染ARHI基因干扰质粒后细胞增殖、迁移、侵袭及抗凋亡能力均明显增强(P＜0.05)。
结论:ARHI基因在人结肠癌中存在表达下调或缺失,并且在结肠癌中也发挥抑癌基因功能。
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