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本实验是在完成了对湖北省大面积发生的玉米粗缩病发生为害,品种自然抗性鉴定及病原分子生物学鉴定的基础上进行的。根据对我国大面积种植的玉米品种的田间抗病性鉴定结果,研究选取对玉米粗缩病毒(MRDV)表现抗病、中感及高感三个类型的代表性品种,分别分析了三叶期、五叶期室内盆栽玉米叶片的过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、酯酶(EST)、超氧化物歧化酶(SOD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)及可溶性蛋白(SPR)的变化,同时对抽穗期田间采取的病叶及健康叶片的以上各生理生化指标进行了系统测定比较分析,旨在研究玉米品种抗感病性与生理生化的关系及感染病毒后的诱导抗病性机理。 研究表明:玉米三叶期、五叶期及抽穗期,感病品种的POD、PPO、PAL酶活性大于抗病品种,显示玉米叶片内的这三种酶含量与品种的感病性有相关性。发病后,各品种酶活性均上升,抗病品种上升幅度最大,说明这些防御酶的应激表达与品种的抗病性相关;抗病品种的SOD酶活力高于感病品种,表明该酶的酶活性与品种的抗病性相关。健叶的酶活力高于病叶,即病毒感染后玉米叶片内的SOD酶活力下降,而且抗病品种的下降幅度最大。说明受病毒影响后玉米SOD酶活性的稳定性与品种的诱导抗病性呈负相关;感病性品种五叶期及抽穗期SPR含量远远高于抗病品种,显示了与品种感病性相关的特性,但是在三叶期,SPR含量呈现相反的结果。说明玉米叶片SPR与品种抗感病性的相关性与一定的生育期相联系。感染玉米粗缩病毒后,各品种的SPR含量均降低,抗病品种下降幅度最小。 POD同工酶研究结果表明:玉米抽穗期,抗病品种健叶具有一条Rf 0.261差异酶带,而感病品种则没有,这一特异蛋白带的组成型表达显示出与品种抗病的相关性,可作为评价品种抗病性的生理生化指标之一。发病后,抗病品种及中感品种又新增一条酶带,Rf为0.471;三叶期及五叶期,抗病品种同样都比感病品种多出现一酶带区,进一步证明了在玉米植株体内存在与抗玉米粗缩病毒相关的POD同工酶,这一结论将为抗病育种提供极有价值的生理生化基础。 EST同工酶研究结果表明:各品种EST同工酶的表达与植株的生育期存在一定的关联,玉米三叶期和五叶期,各品种有四条酶带,而抽穗期仅出现两条。抗、感病品种间,EST同工酶的表达没有明显的差异性,说明该同工酶与品种的抗、感病性没有相关性。感染玉米粗缩病毒后,酶带没有变化,依然为2条,只是颜色加深,说明病毒的侵入能诱导EST的应激表达,参与寄主的抗病性防御反应。 SOD同工酶研究结果表明:在玉米三叶期及五叶期,SOD同工酶种类的表达与品种的抗、感病性没有相关性,各品种的酶带数相同。但在抽穗期的SOD同工酶酶带则发生了变化,抗病品种及中感品种都只有2条酶带,而高感品种出现4条酶带,说明该酶带与品种的感病性相关,而且这种相关性与品种的生育期存在一定的关联。感染MRI)V后,各品种均哥!l现新的SODI司工酶蛋I全I。 PPO同」:酶研究结果表明:抗病品种及,卜感品种受MRDV感染后,PPOI司_一L酶出现了新的较强酶带:山此显示诱一导表达的新酶带区与品种的抗病性有一定的关系。一砚叶期、_Ii.叶期的PPO同_「酶在不同的抗、感病品种间没有区别,均有5条酶’l片。