新生儿缺氧缺血性脑病血管内皮细胞生长因子表达变化的研究

来源 :蚌埠医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zzu123456789zzuliuli
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目的:动态观察新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy, HIE)患儿血液中血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)的含量和VEGF mRNA表达变化,统计分析临床意义,以探求新生儿缺氧缺血性脑病的早期诊断、病情判断及治疗效果分析的检测指标。  方法:1.实验材料:本研究中90例HIE新生儿及30例对照组新生儿血液标本均来自于蚌埠医学院第一附属医院儿科新生儿病房,缺氧缺血性脑病组即观察组根据临床症状分为轻、中、重度HIE组各30例。对照组(非HIE组)30例病例筛选时严格排除神经系统疾病、严重感染、先天性畸形和糖尿病及甲亢母亲患儿。2.实验方法:用乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)抗凝试管抽取研究对象静脉血1ml,即刻离心进行血浆和血细胞分离,采用酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA)定量测定血浆VEGF蛋白含量;血细胞中提取总RNA,鉴定RNA的纯度及完整性,进行逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction, RT-PCR)反应,琼脂糖凝胶成像检测VEGF mRNA的表达。定量资料数据采用x±s表示,多组间均数比较采用单因素方差分析,两两比较用q检验。定性资料用阳性率(%)表示,样本率比较运用χ2检验。所有数据均采用SPSS11.5统计软件分析。  结果:1.血浆VEGF含量检测结果:生后第1天,轻、中、重度HIE组血浆VEGF含量分别为436.75±74.15ng/L、532.91±89.72ng/L和593.05±91.38ng/L,对照组为391.56±66.10ng/L,观察组各组血浆VEGF含量均显著升高(与对照组相比,轻度HIE组P<0.05,中、重度HIE组P均<0.01),HIE程度越重,VEGF含量越高(HIE各组之间相比较,P均<0.01)。第3天,轻、中、重度HIE组血浆VEGF含量分别为411.44±66.59ng/L、429.25±72.36ng/L和549.88±96.04 ng/L,对照组为381.56±65.29 ng/L,观察组各组与第1天相比,血浆VEGF含量下降不明显(P均>0.05),中、重度HIE组血浆VEGF含量维持在高水平状态(与对照组相比,P均<0.01)。第7天,轻、中、重度HIE组及对照组VEGF分别为390.96±72.71ng/L、427.39±80.89ng/L、484.86±101.25ng/L和378.23±64.64 ng/L,观察组各组与第1天比较,VEGF含量均显著性下降(P均<0.01),与对照组相比,轻度HIE组及中度HIE组均无显著性差异(P均>0.05),重度HIE组VEGF含量下降缓慢,仍存在显著性差异(P<0.01)。2.血液VEGF mRNA表达结果:第1天,轻、中、重度HIE组VEGF mRNA阳性表达率分别为52.17%(12/23)、57.89%(11/19)、62.50%(10/16),对照组为16.67%(2/24),统计结果显示:中、重度HIE组阳性表达与对照组比较有显著性差异(P<0.0083),其余组间比较,不具统计学意义。第3天,对照组、轻、中、重度HIE组阳性表达率分别为16.67%(2/24)、26.09%(6/17)、26.32%(5/14)和37.50%(6/10),第7天四组阳性表达率分别为8.33%(2/22)、21.74%(5/18)、21.05%(4/15)和31.25%(5/11)。第3天和第7天的四组阳性表达结果经统计学处理,均无显著性差异(P均>0.05)。各组在第1、3、7天组成的配对数据资料分别经四格表卡方(Pearson校正法)检验,结果显示:对照组和重度HIE组的第1、3、7天VEGF mRNA表达数据经统计学处理无统计学意义;轻度和中度第1天与第3、7天比较均有显著性差异(P均<0.05),第3、7天比较无统计学意义。  结论:新生儿缺氧缺血性脑病患儿早期血浆中的VEGF含量显著增高,病情越重,VEGF含量越高,持续时间也越长;同时中、重度HIE患儿生后1天内的血细胞VEGF mRNA表达也显著性增高。因此,HIE患儿血浆中VEGF含量,对HIE的早期诊断、病情判断以及治疗效果评估有重要意义。检测生后第1天的HIE患儿血液中VEGF mRNA的表达,对HIE的早期诊断、病情判断也有一定的指导意义。
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