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肠球菌是重要的病原菌，能够引起泌尿系统、皮肤软组织等多种脏器的感染，严重时还能引发败血症、心内膜炎、脑膜炎等致死疾病。近年来，抗菌药物在医院临床和兽医临床上的长期过度使用使得肠球菌的耐药问题越来越严重，已成为全球人类健康面临的严重问题之一。多药耐药基因的存在及传播加大了临床治疗肠球菌感染性疾病的难度。因此，研究肠球菌耐药性产生、传播机制及毒力基因携带情况为临床治疗肠球菌感染性疾病提供指导性意义。 本研究以96株猪源和人源肠球菌为基础，对肠球菌进行种属间的鉴定，共分四个种，粪肠球菌最多，占总体菌株的52.1％（50/96）；其次为屎肠球菌，共42株，占43.8%；3株铅黄肠球菌和1株鹑鸡肠球菌。对96株肠球菌进行11种常见抗菌药物敏感性实验并检测其携带耐药基因情况，96株肠球菌对万古霉素均不耐药，大部肠球菌对四环素、红霉素和庆大霉素表现耐药，耐药率分别为86.5%，83.3%和76.0%；对利福平和夫西地酸的耐药率相对较低，分别为35.4%和23.9%；对环丙沙星、氟苯尼考、氯霉素等药物的耐药率均在57%以上。对耐药基因的检测发现，多个菌株携带多种耐药基因，选取一株进行全基因组的测序发现其携带氨基糖苷类耐药基因簇。用PCR对96株肠球菌携带该耐药基因簇的情况进行考察，共检出23株阳性肠球菌，阳性率23.9%。另外，本研究还考查了肠球菌携带毒力基因esp、cylM的情况，其中人源肠球菌esp的阳性率高达96.8%。 为了考查耐药基因簇的传播及在基因组中的位置，本研究进行了 MLST和PFGE菌株分型，接合实验、S1-PFGE、Southern杂交。结果表明23株肠球菌中共分为8个ST型， PFGE谱型中存在相似的谱型，但大多数菌株的PFGE谱型不同，菌株间的谱型差别较大。MLST和PFGE分型结果中相同来源的肠球菌存在分型一样的菌株，有克隆相关性，但是猪源和人源肠球菌之间暂无发现关联性。人源肠球菌耐药基因簇没有发现接合想象，而猪源肠球菌可接合，耐药基因簇存在水平传播的可能性。 通过S1-PFGE与Southern杂交结果可看出，部分菌株的耐药基因簇位于约100kb的质粒上，可水平传播。而有些可能位于染色体上，可能发生垂直传播。耐药基因的传播，加快了肠球菌耐药性的产生。 本课题通过对肠球菌耐药基因的检测及测序发现了氨基糖苷类耐药基因簇，通过菌株分型考察了耐药基因簇可能存在的传播途径，并对耐药基因簇在基因组中的位置定位，为耐药性的防控和药物的研发提供参考。