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本文主要从以下几个部分展开论述： 第一部分 离子色谱检测血清氯离子候选参考方法的建立 目的:本研究旨在利用离子色谱方法建立血清氯检测的候选参考方法，对其色谱分离条件、定量方式以及检测性能进行完善和确立，并将其与其他参考实验室的血清氯测量进行比较，使其能满足该项目参考方法的要求。 方法:本研究建立了离子色谱检测血清氯的方法，溯源至SRM919b氯化钠纯度标准物质。方法建立过程重点考察了色谱分离系统，包括Dionex ICS1100离子色谱仪，配备保护柱AG9-HC、分离柱AS9-HC和自动再生连续工作型阴离子抑制器ARES500，以及电导检测器;手工配制的2mmol/L Na2CO3+12mmol/L NaOH淋洗液，1mL/min流速，25μL进样量，15min检测时长。色谱积分模式采用Chromelon7.2.4色谱工作站中Chromelon6运算方式，在5-15min内进行积分。样本处理方式为重量法进行稀释500倍，并采用0.45μm的色谱级别的一次性滤膜单元过滤，即可上机检测。校准模式为外标包括法，系列校准溶液包括由重量法进行配制的五点浓度，每个标准浓度区间内包括3-4个待测样本，通过样本前后测定的标准溶液的测定结果计算样本浓度，以此仪器漂移带来的影响。正式样本检测之前，开机启动流动相和抑制器电流稳定1-2小时，待电导信号稳定即启动检测序列。以超纯水作为所有稀释过程的稀释剂和进行空白监测。根据美国临床实验室标准化协会(CLSI)相关文件，采用三个浓度水平的混合病人血清对方法的精密度、回收率进行考察;采用美国国家标准技术研究院(NIST)研制的血清参考物质SRM956d和SRM909c对方法的正确度进行考察;同时对检测引入的不确定度进行分析。完成方法建立后，利用该离子色谱检测方法参加2017年国际实验室间比对，通过对两个浓度水平的样本进行检测与参考实验室结果进行比较。 结果:该色谱条件下，氯离子保留时间为6.3min左右，峰形良好，分离度满足大于1.5，且连续进样的峰面积信号RSD满足大部分小于0.5％。考察标准溶液的峰面积与浓度之间的线性关系，其相关系数满足0.999-0.9999之间，截距接近0。考察方法的精密度，结果显示该方法的精密度良好，其重复性（批内CV）、批间精密度和实验室内CV分别为0.20％-0.29％，0.09％-0.27％，和0.22％-0.37％。考察方法的加样回收率，以超纯水作为对照，高中低三个水平的血清样本的平均回收率分别为100.08％，100.01％和100.15％，说明方法的特异性较好。采用国际血清标物进行方法准确度的考察，4种血清标准物质的测定结果的均值与标准物质证书认定值之间的偏倚为-0.19％--0.06％，实验室内CV分别为0.27％-0.82％。样本测量的相对扩展不确定度为0.775％，k=2。国际实验室间比对结果显示，该离子色谱方法检测结果与其他参考实验室无明显差异。 结论:本实验室建立的离子色谱检测血清氯的方法具有较高的精密度和正确度，与国际上其他参考方法具有可比性，可以作为血清氯检测的候选参考方法，进一步用于物质定值和常规方法性能评价等方面。 第二部分 血清氯常规检测系统的测量偏倚和制备物互通性的评价 目的:评价我国常用的血清氯常规检测系统的偏倚，为临床实验室选择合适的检测系统提供依据，对我国常规检测的质量进行性价;考察不同制备物的在这些常规系统上的互通性，可以为我国室间质评、正确度验证项目及标准物质的制备遴选合适的材料。 方法:采用实验室建立的离子色谱血清氯检测候选参考方法作为比对方法，待评价的9个常规检测系统的原理包括离子选择电极法（贝克曼AU、贝克曼DXC、日立、罗氏Cobas和迈瑞系统），干化学法（强生VITROS系统）以及硫氰酸汞比色法（北京利德曼、宁波美康、中生北控试剂）。根据EP9-A3、EP14-A3以及血清氯医学决定水平的范围，收集60份单人新鲜病人血清，并插入22个待评价互通性的制备物，包括电解质二级候选标物、电解质正确度验证物质、常规化学室间质评物质、动物血清、水溶液和混合病人剩余血清。在检测血清盘之前，利用混合病人血清样本对比对方法的准确度和常规方法的精密度进行评价，并熟悉操作过程。将以上标本在同一时段分别以9个待评价的系统进行检测，同时利用比对进行测定。以比对方法检测60份单人血清的结果为X轴，以各常规检测系统测定结果为Y轴制做散点图，进行简单线性回归(OLR)分析，评价相关性。绘制相对偏倚分布图，分别采用由生物学变异导出的最低性能规范中±0.7％允许偏倚和卫生行业标准临床化学检验常规项目分析质量指标(WS/T403-2012)中±1.5％允许偏倚为评价标准，评价对各常规检测系统的平均偏倚和在两个医学决定水平上的预期偏倚是否满足要求。根据回归曲线计算Y值的双侧95％预测区间，根据制备物检测结果位置是否落在回归曲线的95％预测区间内来评价其是否具有互通性，或计算该物质的基质相关偏倚并与1.5％允许偏倚进行比较。 结果:精密度评价结果显示，离子色谱比对方法的精密度为0.21％-0.51％，平均偏倚为-0.06％;9种常规系统中除贝克曼DXC和中生北控外的7个检测系统的精密度均满足生物学变异推导的最低性能规范中0.9％的允许CV。简单线性回归结果显示，6种ISE种常规系统检测的的相关系数均大于0.99，残差标准差为0.5095-0.9667;3种比色法检测的相关系数均大于0.98，残差标准差为1.1425-1.2182。偏倚评价结果显示，9种常规检测系统的平均偏倚为-8.20 mmol/L-1.48 mmol/L(-7.42％-1.36％)，医学决定水平处的预期偏倚为-4.47 mmol/L-4.62 mmo/L(-4.97％-5.13％)和-7.22mmol/L-2.11 mmol/L(-6.02％-1.76％)。仅贝克曼AU、迈瑞和宁波美康检测结果的平均偏倚小于±0.7％允许偏倚的评价标准，贝克曼DXC结果平均偏倚小于±1.5％允许偏倚。贝克曼AU和迈瑞在两个浓度的预期偏倚以及中生北控在低值的预期偏倚小于±0.7％允许偏倚，贝克曼DXC和强生在低浓度的预期偏倚小于±1.5％允许偏倚。贝克曼AU和迈瑞检测系统的偏倚分布在零附近，贝克曼DXC检测存在持续正偏倚且数值有随浓度增高而增高的趋势，日立、强生和罗氏尊在持续负偏倚，中生北控、宁波美康和利德曼检测的偏倚在低浓度为正高浓度为负且后两者数值有随浓度增高而降低的趋势。互通性评价结果显示，以95％预测区间进行评价时，电解质二级候选标物在贝克曼AU检测系统上高值样本呈正基质效应，在迈瑞检测系统上低值样本表现出负基质效应;电解质正确度验证样本中低值样本均具有较好的互通性（除T1711样本在贝克曼DXC系统呈负基质效应），高值样本在4个ISE检测系统上均表现出正基质效应; 6个常规化学室间质量评价物质中，除EQA1714之外的样本在贝克曼DXC、强生、利德曼、中生北控和宁波美康系统上均表现出良好的互通性，在其余4个系统上均表现出负基质效应，而低浓度的EQA1714样本在中生北控和宁波美康之外的所有系统上都表现出明显的负基质效应;动物血清和混合病人血清在绝大部分检测系统上均无表现出很好的互通性;水溶液样本在ISE检测系统上均显示明显的负基质效应，而在比色法检测系统上几乎均无基质效应。以1.5％允许偏倚评价互通性时，电解质二级候选标物在日立和利德曼系统上均无基质效应，低值样本在部分检测系统呈负基质效应，高值样本在部分系统呈正基质效应;电解质正确度验证样本在强生和利德曼系统上无基质效应，高值样本在其余检测系统上多呈正基质效应，低值样本在贝克曼DXC和日立系统上显示负基质效应;常规化学室间质量评价物质在所有系统上均显示出基质效应，且多为明显的负基质效应;动物血清样本除低值在贝克曼AU和日立系统呈正基质效应外，其余样本在所有系统上均无基质效应;混合病人血清样本除高值在罗氏和迈瑞系统呈正基质效应外，余样本在所有系统上均无基质效应;所有的水溶液样本在ISE检测系统上均显示明显的负基质效应，而在比色法检测系统中，低值样本在利德曼和宁波美康系统呈负基质效应，高值样本在中生北控系统呈正基质效应。 结论:多数常规系统在血清氯的检测上存在明显校准偏倚，超出1.5％允许偏倚要求。试剂生产厂家应关注校准品定值的溯源性问题。部分参考物质及制备物在常规系统中表现出基质效应，在使用这些物质时，应明确其互通性。