重组人粒细胞集落刺激因子的I标记及其在大鼠肺内吸收的研究

来源 :中国医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hanjzh
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目的 利用Iodogen法对重组人粒细胞集落刺激因子进行<125>Ⅰ标记,制备了<125>Ⅰ-rhG-CSF,并由气管给入大鼠肺内,对其吸收情况及对白细胞数量的影响进行研究.为该因子新的给入途径的开辟提供实验依据.方法 <125>Ⅰ-rhG-CSF的制备:在预先涂有一定量Iodogen的试管中,依次加入0.05mol/L(PH7.6)的PBS50μl,rhG-CSF纯品溶液100μl(75μg/100μl),Na125Ⅰ溶液10μl(37MBq),室温条件下反应15分钟,反应中每隔3分钟温和振荡30秒,终止反应后再加PBS(PH7.6)40μl,继续在室温下静置5~10分钟.给药方法及血样采集:吸收实验经肺给药组由气管内给入<125>Ⅰ-rhG-CSF 5μg/kg于给药前和给药后30、60、90、120、240、360、480分钟由颈内静脉采血0.1ml并测其放射性.吸收实验静脉给药组由颈内静脉注射<125>Ⅰ-rhG-CSF 5μg/kg于给药后5、10、15、20、30、60、90、120、240、360、480分钟由颈内静脉采血0.1ml并测其放射性.该因子对白细胞数量影响实验给药组分别由气管给入rhG-CSF10μg/kg、50μg/kg、100μg/kg、200μg/kg于给药前和给药后8、16、24、32、40、48、56、64、72小时由尾静脉采血50μl并进行白细胞计数.对照组由气管给入生理盐水并于同禅时间点采血计数白细胞.比较各给药途径对白细胞数量影响的实验组分别由气管、静脉、皮下给入rhG-CSF 200μg/kg,对照组由气管给入生理盐水,采血点及白细胞计数同上.结论1.用Iodogen法对rhG-csf进行<125>Ⅰ标记,方法简便,标记率高,稳定性好.2.气管内给入该因子是较为有效的途径,具有潜在的应用前景.
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