结直肠癌肝转移标志物的筛选和临床相关性分析及雪莲对结肠癌细胞抑制作用的研究

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结直肠癌是消化道常见恶性肿瘤,最近几十年里,结直肠癌全球发病率和死亡率呈上升趋势。肝脏转移是结直肠癌治疗失败的主要原因,肝转移的治疗仍以综合治疗为主,手术切除是主要的治疗手段。目前临床尚缺少客观的标准指导治疗。在肿瘤发生发展进程中,可能存在相关的肿瘤标志物,我们可以通过对这些标志物的检测预知肿瘤的进展和风险,为准确指导治疗提供依据。选择收集了112例结直肠癌肝转移和103例无肝转移的临床原发瘤组织标本切片。免疫组化法分析了7个候选分子标志物在20例结直肠癌组织中的表达及其与临床的关系。结果haptoglobin (HP)、osteopontin (OPN)和prostaglanbin I 2 synthase (PTGIS)表达在肝转移组和未肝转移组结直肠癌原发瘤有统计学差异。将三个标志物扩大病例,检测它们在所有肝转移和无肝转移组表达差异,发现它们的表达具有预示结直肠癌肝转移的临床应用价值。联合分析这三个分子标志物的表达或者结合肿瘤临床分期显示其预示肝转移的敏感性分别是78.6%和84.3%,特异性分别是83%和85.2%。这些结果表明,对结直肠癌肝转移原发灶和无肝转移结直肠癌原发灶组织标本差异表达基因谱分析比较,能够用于筛选预示结直肠癌肝转移相关基因。研究发现中草药能够辅助结直肠癌病人术后放化疗,改善病人生存质量。而结直肠癌发生与其基因表观遗传修饰密切相关,我们初步研究发现雪莲总黄酮能够抑制M.AluⅠ甲基化酶活性。通过CCK-8增殖检测雪莲总黄酮对结肠癌细胞和其它多种癌细胞增殖的作用,其抑制率呈剂量和时间依赖性。雪莲总黄酮作用癌细胞后RT-PCR结果显示,雪莲总黄酮能够使kyse510细胞中沉默的p16基因重新表达;流式DNA分析显示雪莲总黄酮影响kyse510细胞周期变化。HpaⅡ,MspⅠ同工酶切检测雪莲黄酮作用癌细胞后细胞基因组甲基化稳定性发生改变。结果表明,雪莲总黄酮能抑制癌细胞增殖,其抑制机制与基因组甲基化状态及稳定性密切相关,为雪莲总黄酮在预防和治疗癌症提供研究基础。
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