【摘 要】
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本文将含GRF重组质粒的JM109菌株大量培养，用碱裂变法提取质粒，用DNACaculator定量；制备含GRF的原生质体，经1％的戊二醛处理后注射于家兔肌肉，在注射部位给予电刺激，提取总RNA，用RT-PC
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本文将含GRF重组质粒的JM109菌株大量培养，用碱裂变法提取质粒，用DNACaculator定量；制备含GRF的原生质体，经1％的戊二醛处理后注射于家兔肌肉，在注射部位给予电刺激，提取总RNA，用RT-PCR检测GRF在肌肉中的表达；用ELISA法定性检测GRF在肌肉中蛋白质水平的表达；将该原生质体注射于小鼠肌肉中，定期提取DNA，初步探讨原生质介导的外源性GRF在小鼠肌肉中的表达时间。研究结果表明，以原生质体介导的外源性GRF基因可以在家兔和小鼠肌肉中表达，通过PCR、RT-PCR和ELISA都可以检测到表达产物。电击可以促进原生质体与肌肉细胞的融合，但100V，50毫秒的低压、短脉冲电击对GRF在动物体内的表达量上没有被观察到显著差异。通过提取注射部位DNA后进行PCR鉴定，可以确认原生质体介导的GRF基因至少可以在受试动物体内滞留28天以上，为GRF的长期表达提供了条件。
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