过表达CdSAMDC提高假俭草抗寒性

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假俭草(Eremochloa ophiuroides(Munro)Hack.)是世界三大暖季型草坪草之一,也是蜈蚣草属中唯一可作为草坪草的草种,但抗寒能力差。SAMDC是把Put转化为Spd和Spm的关键酶,通过上调假俭草内SAMDC的表达量可以提高假俭草Spd和Spm的含量。本研究以过表达SAMDC假俭草为材料,鉴定其抗寒性,并探讨其抗寒性提高的机制,结果如下:测定了过表达SAMDC假俭草和野生型的多胺含量,结果表明过表达SAMDC假俭草和野生型的Put含量没有显著差异,但过表达SAMDC的Spd和Spm含量显著高于野生型。对转基因假俭草和野生型对照一起进行冷害处理,处理后转基因假俭草的MDA含量、H2O2含量和相对电导率低于野生型,而SOD活性、CAT活性、气孔导度和Fv/Fm则高于野生型,证明了转基因假俭草的抗冷性强于野生型。对转基因假俭草和野生型对照进行低温驯化,然后测定低温驯化前后野生型和转基因假俭草的半致死温度、脯氨酸和可溶性总糖含量。结果表明正常情况下,转基因假俭草有较低的半致死温度,较高的脯氨酸和可溶性糖含量;而经过低温驯化后转基因和野生型假俭草的差异更显著。以上结果证明转基因假俭草的抗冻性强于野生型。为了研究SAMDC诱导假俭草抗寒性的机理,分别测定了SAMDC过表达假俭草和野生型的PAO活性、H2O2含量、NR活性、NO含量和抗氧化酶活性,并探讨了其抗寒机制。结果表明通过提高SAMDC的表达量,Spd和Spm含量上调,PAO活性增强,H2O2含量上调。H2O2一方面诱导SOD和CAT的活性;另一方面H2O2通过增强NR活性来提高NO含量,进一步增强CAT活性;最后,Spd和Spm诱导了脯氨酸和可溶性糖的生成,最终提高了假俭草的抗寒性。
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