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随着转基因农作物技术及其应用的快速发展，多个国家制定了用于监管的转基因产品标识制度。该制度的有效实施，关键在于建立准确可靠的转基因检测技术。目前转基因产品的检测主要有基于DNA水平的PCR方法和基于蛋白质水平的免疫学检测方法，国内以PCR方法为主，而鲜有转基因产品免疫学检测法应用的报道。为了探索此方法的应用前景，本研究以转基因耐除草剂大豆及其加工产品为材料，建立了快速方便、准确可靠的检测转基因大豆及其产品中外源蛋白5-烯醇丙酮酸莽草酸-3-磷酸合酶(5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase，EPSPS)的酶联免疫吸附(Enzyme-IAnked Immunosorbent Assay，ELJSA)检测体系，为建立转基因产品的免疫学检测体系打下了一定的基础。
本研究主要取得了如下结果：
1.在大肠杆菌中重组表达EPSPS，利用Ni-NTA柱层析方法进行纯化，纯化蛋白通过梯度透析方法进行复性，恢复了天然蛋白的立体构象或关键抗原决定簇构象。
2.将制备的EPSPS抗原免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。对抗血清采用饱和硫酸铵方法进行纯化，经间接ELISA测定，纯化抗体效价可以达到1：2,048,000以上。应用Western Blotting方法对转基因大豆进行检测，能检测到的最低转基因含量是0.5％。
3.将制备的EPSPS抗原免疫Balb/C小鼠制备单克隆抗体。通过细胞融合、杂交瘤筛选和亚克隆后，获得13株能稳定分泌抗EPSPS抗体的杂交瘤细胞株。对其中一株特异性较好的细胞株5G181-01进行分析鉴定，其染色体数目符合杂交瘤细胞的理论值，分泌抗体亚型为IgG 2a，轻链为κ链。用5G181-01细胞株制备腹水，腹水经饱和硫酸铵分级沉淀、蛋白A亲和层析后可达到电泳纯，纯化后抗体效价可以达到1：2,048,000以上。应用Western Blotting方法对转基因大豆进行检测，其检测限是0.5％，且本底很低。
4.利用制备的多克隆抗体和单克隆抗体，建立双抗体夹心ELISA检测体系。对反应体系中的抗体浓度、封闭剂、抗体稀释液、抗原抗体反应时间和显色时间进行了优化。利用纯化并定量的EPSPS蛋白，建立了标准曲线，达到定量检测的目的。应用该方法检测转基因大豆，其检测限是1％，回收率范围在87.2％～105.6％之间，批内变异系数在2.2％～10.8％之间，批间变异系数在9.7％～11.3％之间。
5.应用建立的双抗体夹心ELISA方法对大豆加工产品进行检测，结果表明，该方法可以检测到豆粕、豆浆中的转基因成分，而购于市场的饼干、酱油、咖啡伴侣等深加工产品则未检测到外源EPSPS蛋白成分。本研究建立的ELISA方法，可应用于大豆原料及其粗加工产品的检测，该技术已申请了中国发明专利(公开号：CN101042403)。